Генетично модифіковані імунні клітини демонструють потенціал для запобігання відторгненню органів

У журналі Frontiers in Immunology було представлено експериментальну клітинну терапію, яка може «роззброїти» пацієнтів з високою імунною сенсибілізацією перед трансплантацією органів. Вчені створили регуляторні Т-клітини (Treg) з химерним рецептором антитіл проти HLA (CHAR) — по суті, з «приманкою» білка HLA-A2, який активує Treg при контакті з B-клітинами, що продукують антитіла проти HLA-A2. In vitro ці CHAR-Treg розпізнавали та пригнічували продукцію високоафінного IgG у пресенсибілізованих пацієнтів, зберігаючи при цьому «ідентичність» Treg (FOXP3/HELIOS) та не вбиваючи клітини-мішені. Це дає можливість цілеспрямованої десенсибілізації без повної імуносупресії.

Передумови дослідження

У трансплантології основним «конфліктом інтересів» є антитіла проти HLA-антигенів донора. Після переливання, вагітностей або попередніх трансплантацій у реципієнта часто розвивається сенсибілізація: анти-HLA IgG та B-клітини пам'яті, готові швидко «розгорнутися», вже циркулюють у крові. Такі пацієнти менш сумісні, довше чекають на орган і мають вищий ризик гострого та хронічного відторгнення антитіл. Стандартні протоколи десенсибілізації (плазмаферез/імуноадсорбція, високі дози IVIG, ритуксимаб, інгібітори протеасом, імліфідаза) діють широко та приблизно: вони зменшують загальний пул антитіл або клітин, але не спрямовані на конкретні «небезпечні» клони та супроводжуються токсичністю та інфекційними ризиками.

Імунна система має власне «гальмо» – регуляторні Т-клітини (Treg), які підтримують толерантність до «чужорідного». В останні роки Treg-терапія стала справжньою клінічною стратегією, але у «замовчувальному» варіанті вона є неселективною: ін'єктовані клітини не розрізняють, проти якого антигену розвивається реакція. Тому дослідники намагаються «накрутити на мішень» – оснастити Treg штучними рецепторами, які спрацьовують лише тоді, коли зустрічають потрібний сигнал. Так виникла ідея химерних рецепторів (подібних за духом до CAR-технологій), але зібраних не на основі анти-CD19, а з доменів самих молекул HLA, щоб Treg активувалися поблизу В-клітин, що виробляють відповідні анти-HLA антитіла.

Критичні вимоги до таких «цільових» Treg подвійні. По-перше, вони повинні залишатися справжніми Treg (зберігати FOXP3/HELIOS та супресорні програми), не порушуючи ефекторний фенотип на тлі сильної стимуляції. По-друге, їхня дія має бути цілеспрямованою: пригнічувати саме алоспецифічні B-клони та плазмобласти, мінімально втручаючись у решту імунної системи, щоб не підвищувати вартість лікування при інфекціях та ризики пухлини. Якщо цю проблему буде вирішено, з'явиться метод м'якої, точкової десенсибілізації перед трансплантацією та зменшення потреби в повній імуносупресії після неї.

Нарешті, практичний контекст: у деяких пацієнтів сенсибілізація спрямована на один або два «проблемні» алелі (наприклад, HLA-A2), і саме вони блокують доступ до органів. Клітинна терапія, спрямована на такі «вузькі місця», може розширити пул сумісних донорів, пришвидшити трансплантацію та зменшити частоту відторгнення антитіл, особливо у дітей та реципієнтів з тривалим «історичним» контактом з чужорідним HLA (багаторазові переливання, повторні трансплантації). Таким чином, доказ принципу для анти-HLA-індукованих Treg є важливим кроком до персоналізованої імуномодуляції в трансплантології.

Як структурована нова клітина

• Конструкція: позаклітинний домен HLA-A2 + шарнір CD8 + трансмембранний CD28 + сигнальний "тандем" CD28-CD3ζ. Цей рецептор активується, коли на поверхні B-клітини є антитіло проти HLA-A2.
• Специфічність: CHAR-Treg «стартують» специфічно на анти-A2 B-клітинах, не впливаючи на інші імунні системи.
• Профіль Safe Treg: після активації не втрачають лінійні маркери (FOXP3, HELIOS), тобто залишаються «гальмами» і не перетворюються на «газ».
• Нецитотоксичний: на відміну від модифікованих звичайних CD4 Т-клітин з тим самим рецептором, CHAR-Treg не вбивають анти-A2 клітини, але пригнічують їхню функцію.

Що саме перевіряли?

• Модель пацієнта ex vivo: мононуклеарні клітини крові пацієнтів, пресенсибілізованих до HLA-A2, були активовані стимулами (HLA-A2-K562), потім додані CHAR-Treg та виміряні IgG (ІФА) та склад B-клітин (спектральна проточна цитометрія, UMAP).
• Результат: через 48 годин та 5 днів продукція IgG була значно знижена (у 2 з 3 зразків пацієнтів), частка B-клітин загалом зменшилася без очевидного «вибору» між підтипами (наївні, з порушенням пам'яті, маргінальної зони, плазмобласти).
• Інтерпретація авторів: Чутливість аналізу можна підвищити за допомогою специфічного для анти-А2 ІФА та окремої оцінки класів IgG; необхідне тестування у більшої кількості пацієнтів та на інші алелі HLA (наприклад, А24).

Чому це важливо для трансплантації?

Сьогодні 20% первинних та до 75% повторних реципієнтів вже мають антитіла до HLA, що різко звужує пул відповідних донорів та вимагає високих доз імуносупресії. Неселективні протоколи десенсибілізації (плазмаферез, «нульове обнулення» В-клітин) працюють нерівномірно та чреваті ускладненнями – від інфекцій до нефро- та нейротоксичності (особливо у дітей). Таргетні Treg, що діють лише проти «небезпечних» В-клонів, теоретично дозволяють розширити доступ до органів та знизити загальну токсичність після трансплантації.

• Основні потенційні переваги:
  • Перед трансплантацією: «видалити» сенсибілізацію до певного HLA та зробити пацієнта порівнянним з несенсибілізованим пацієнтом.
  • Після трансплантації: зменшити дози базової імуносупресії та ризики хронічного відторгнення антитіл.
  • Після трансплантації: цей підхід має потенційне застосування при ВГС і навіть у випадках викидня, коли у матері розвиваються антитіла до HLA батька.

Що кажуть самі автори та публікації у пресі

Команда MUSC (США) називає цю роботу «першим кроком до цілеспрямованої імуносупресії: пригнічення саме тих B-клітин, які загрожують трансплантату, залишаючи решту імунної системи в спокої». У прес-релізі підкреслюється потенціал зменшення побічних ефектів та «зрівняння умов гри» для тих, кому наразі майже неможливо пересадити органи через сильну сенсибілізацію.

Де межі і що далі?

• Це доказ принципу in vitro/ex vivo на невеликій кількості зразків пацієнтів: ще зарано говорити про клінічні результати. Потрібні перші випробування на людях, валідація різних HLA та поглиблене дослідження механізмів (секретовані фактори, контакт-залежне пригнічення, транскриптоміка CHAR-Treg).
• Важливо розробити специфічність та безпеку: переконатися, що пригнічення суворо спрямоване на антиген і не порушує інші гілки імунітету.

Що слід пам'ятати

• Treg-клітини, сконструйовані з використанням «приманки» HLA-A2, розпізнають та пригнічують B-клітини, небезпечні для трансплантата.
• In vitro вони знижують продукцію IgG у сенсибілізованих пацієнтів та підтримують стабільність фенотипу Treg без цитотоксичності.
• Це цілеспрямована альтернатива неселективній десенсибілізації з потенціалом для зниження доз імуносупресії та розширення доступу до трансплантації. Наступним кроком є клінічні випробування.

Джерело: Валентин-Кірога Х. та ін. Химерні людські регуляторні Т-клітини, сконструйовані за допомогою генної інженерії проти рецепторів HLA-антитіл, пригнічують специфічні для алоантигену В-клітини у попередньо сенсибілізованих реципієнтів трансплантата. Frontiers in Immunology, опубліковано 15 серпня 2025 р. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385