Збудник туляремії

Туляремія - первинна хвороба тварин (гризунів), у людини протікає у вигляді гострого інфекційного захворювання з різноманітною клінічною картиною і повільним відновленням працездатності. Збудник туляремії - Francisella tularensis - відкритий Г. Мак-якому і Ш. Чепіна в 1912 р під час епізоотії серед земляних білок в місцевості з озером Туляре (Каліфорнія), докладно вивчений Е. Френсісом, в честь якого і названий рід.

Це дуже маленькі, розмірами 0,2-0,7 мкм кокковидной або еліпсоїдні поліморфні палички, які дуже часто при спеціальних методах фарбування дають біполярну забарвлення; нерухомі, грамнегативні, спор не утворюють; каталазонегатівни, утворюють H2S, строгі аероби, температурний оптимум для росту 37 ° С, рН 6,7-7,2. Вірулентні штами мають капсулу, утворюють кислоту без газу при ферментації деяких вуглеводів (глюкоза, мальтоза, манноза, фруктоза, декстрин), ступінь ферментації у різних штамів варіює, зміст Г + Ц в ДНК - 33-36 мовляв%. F. Tularensis на звичайних середовищах не росте. Г. Мак-Кой і Ш. Чепін використовували згорнуту желточную середу. На ній туляремійная паличка зростає у вигляді ніжних дрібних колоній, що нагадують крапельки роси, потім культура набуває характеру ніжного шагренева нальоту зі слабо вираженою слизової консистенцією. Е. Френсіс запропонував для вирощування туляремійной палички живильний агар, що містить 0,05-0,1% цистину, 1% глюкози і 5-10% крові. На такому середовищі зростання більш пишний і грубий: колонії круглі з гладкою поверхнею, молочного кольору, вологі, зі слизовою консистенцією, оточені характерним зеленим ореолом. Зростання повільний, максимального розміру колонії досягають на 3-5-й день (1 - 4 мм). Туляремійні бактерії добре розмножуються в желточном мішку курячого ембріона, викликаючи його загибель на 3-4-й день.

Для зростання F. Tularensis необхідні наступні амінокислоти: аргінін, лейчін, ізолейцин, лізин, метіонін, пролін, треонін, гістидин, валін, цистин, для деяких підвидів - серії, тирозин, аспарагінова кислота; крім того, для Роста вони потребують також в пантотенової кислоті, тіамініта іони Mg2. З урахуванням цих особливостей для культивування F. Tularensis можна використовувати синтетичні середовища.

Рід Francisella віднесений до класу Gammaproteobacteria, тип Proteobacteria. До цього ж роду належить F. Novicida, патогенність якої для людини не встановлена.

Збудник туляремії є внутрішньоклітинним паразитом. Його вірулентність обумовлена капсулою, гнітючої фагоцитоз; нейрамінідазою, яка сприяє адгезії; ендотоксинів; алергенними властивостями клітинної стінки, а також здатністю розмножуватися в фагоцитах і пригнічувати їх кілерних ефект. Механізми вірулентності поки не розшифровані. Крім того, у туляремійной палички виявлені рецептори, здатні взаємодіяти з Fc-фрагментами імуноглобулінів класу IgG. В результаті такого зв'язування порушується активність систем комплементу і макрофагів.

F. Tularensis в S-формі (отруйний) має два антигену - О і Vi (капсульний антиген). О-антиген виявляє спорідненість з антигенами бруцел. Дисоціація S-> SR-> R призводить до втрати капсули, вірулентності і імуногенності. Вид F tularensis поділяють на три географічні раси (підвиду):

• Голарктичну (слабопатогеннимі для домашніх кроликів, не ферментує гліцерину і не має ферменту цітруллінуреідази, зустрічається в країнах північної півкулі);
• середньоазійську (малопатогенних для кроликів, має цітруллінуреідазу і ферментує гліцерин);
• Неарктичного (американську), більш патогенна для кроликів, ферментує гліцерин, має цітруллінуреідазу.

Крім того, штами американського і середньоазіатського підвидів мають фосфатазной активністю, відсутньої у штамів Голарктичної підвиду.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Резистентність збудника туляремії

F. Tularensis досить стійка у зовнішньому середовищі, особливо якщо міститься в патологічному матеріалі. У фуражі, зерні, забруднених виділеннями хворих гризунів, виживає до 4 міс; в воді - до 3 міс; в льоду - більше 1 міс. Чутлива до прямих сонячних променів (гине за 30 хв), високій температурі (при 60 ° С гине через 10 хв), під дією 3% розчину лізолу, 50% -ного спирту, формаліну та інших антисептиків гине через 5-10 хв.

Епідеміологія туларерії

Основним резервуаром туляремії в природі є гризуни, серед яких в природних умовах спостерігаються епізоотії. Людина заражається тільки від тварин, від людини до людини збудник не передається. Збудник виявлений у 82 видів гризунів і Зайцеподібні, найбільш часто зустрічається у представників 4 сімейств: мишоподібних (Muridae), заячих (Leporidae), болючих (Sciuridae) і тушканчікових (Dipodidae). На території Росії основними носіями є мишоподібні гризуни: водяні щури, звичайні полівки, будинкові миші і ондатри.

За чутливості до туляремії тварини можуть бути розбиті на чотири групи:

• 1-я група - найбільш сприйнятливі (полівки, водяні щури, домові миші, білі миші, морські свинки і деякі інші). Мінімальна смертельна доза становить одну мікробну клітину;
• 2-я група - менш чутливі (сірі щурі, ховрахи та ін.). Мінімальна смертельна доза - 1 млрд мікробних клітин, однак для зараження деяких з них достатньо однієї мікробної клітини;
• 3-тя група (хижаки - кішки, лисиці, тхори). Стійкі до високих заражающим дозам, захворювання протікає без видимих проявів;
• 4-я група - несприйнятливі до туляремії (копитні тварини, холоднокровні, птиці).

Для людини мінімальна доза інфікуються - одна мікробна клітина. Зараження людини відбувається всіма можливими способами: прямим і непрямим контактом з хворими гризунами, їх трупами або з предметами, зараженими гризунами; аліментарним (при вживанні харчових продуктів і води, інфікованих гризунами), повітряно-пиловим і трансмісивним шляхом. Зараженість туляремійний бактеріями встановлена у 77 видів кровосисних членистоногих. Особливо велике значення мають іксодові кліщі, у яких збудник зберігається протягом усього життя і навіть передається трансовариально потомству. Ці обставини сприяють укоріненню хвороби в природі. Зараження людини кліщами відбувається не шляхом укусу, а в результаті попадання збудника на шкіру разом з випорожненнями кліща.

На території Росії розрізняють 7 основних ландшафтних типів природних вогнищ туляремії: поіменно-болотний, лучно-польової, степовий, лісовий, передгірної струмкової, тундровий і тугайна (поіменно-пустельний).

[7], [8], [9], [10], [11],

Симптоми туляремії

Збудник туляремії проникає в організм через зовнішні покриви (пошкоджену і неушкоджену шкіру і слизові). На місці впровадження нерідко утворюються виразки. Через лімфатичні судини бактерії потрапляють в регіонарний лімфатичний вузол і безперешкодно розмножуються в ньому; запальний процес призводить до формування бубон. Звідси збудник проникає в кров, бактеріємія обумовлює генералізацію процесу, до нього залучаються різні органи і тканини, розмноження в яких бактерій призводить до утворення гранулем і некротичних виразок. З бактериемией і генералізацією пов'язана алергічна перебудова організму. Інкубаційний період туляремії варіює від 2 до 8 днів. Хвороба починається гостро: з'являються лихоманка, головний біль, болі в м'язах, гіперемія обличчя. Подальший перебіг залежить від місця вхідних воріт, відповідно до якого розрізняють наступні клінічні форми туляремії: виразково-железистую (бубонна), очі-залізисту, ангінозний-железистую, абдоминальную і легеневу. Летальність при туляремії не перевищує 1-2%.

Постінфекційний імунітет міцний, стійкий, в більшості випадків довічний, має клітинну природу, обумовлений головним чином Т-лімфоцитами і макрофагами, в меншій мірі - антитілами. Фагоцитоз у осіб, що мають імунітет, має завершений характер.

Лабораторна діагностика туляремії

Для діагностики туляремії застосовують все мікробіологічні методи. Дослідження проводять в режимних лабораторіях. Матеріал для дослідження - кров, пунктат з бубону, зішкріб з виразки, виділення кон'юнктиви, наліт із зіву, харкотиння та ін. - визначається клінічною формою хвороби. Крім того, на дослідження можна брати воду і харчові продукти. У природних вогнищах туляремії проводять планові систематичні дослідження для виділення збудника туляремії від гризунів.

Бактеріологічний метод діагностики туляремії у людини рідко дає позитивні результати. Чисту культуру, як правило, виділяють після накопичення її на сприйнятливих лабораторних тварин. Для біопроби використовують білих мишей і морських свинок. Мишей заражають підшкірно, морських свинок - внутрибрюшинно; тварини гинуть на 3-6-е добу, іноді по інеї. Заражених тварин містять в особливих умовах {як при діагностиці чуми) і спостерігають за ними протягом 6-14 днів. Гелі експериментальні тварини протягом 7-15 днів не гинуть, їх забивають на 15-20-й день і трупи розкривають. При наявності туляремії виявляють патолого-анатомічні зміни у вигляді продуктивного процесу з некрозом. Чисту культуру виділяють з внутрішніх органів на желточной середовищі, глюкозоцістеіновом кров'яному вогнищі і ін. При ідентифікації спираються на морфологію і тинкторіальних властивості збудника, відсутність зростання на МПА, агглютинацию гомологичной сироваткою. Патогенність для білих мишей і морських свинок. Чисту культуру можна виділити, заражаючи 12-денні курячі ембріони і жовтковий мішок. Для виділення чистої культури збудника з води її центрифугують або фільтрують через бактеріальні фільтри і осадом заражають лабораторних тварин. При дослідженні харчових продуктів їх промивають МП Б, центрифугують і осадом заражають лабораторних тварин.

Одночасно з бактеріологічним дослідженням з досліджуваного матеріалу готують мазки-відбитки і фарбують їх за Романовським-Гімзою. В мазках з органів можна виявити дрібні кокковидной і паличкоподібні бактерії, які розташовуються внутрішньоклітинно і у вигляді скупчень, утворюючи ніжну капсулу.

Для діагностики використовують розгорнуту реакцію аглютинації, РПГА, РІФ.

Алергічні проби застосовують для ранньої діагностики туляремії (з 5-го дня від розпочата хвороби). Використовують два вила туляріна і відповідно два способи їх введення: накожний і внутрішньошкірний. Так як концентрація алергену в обох видах туляріна різна, неприпустимо використовувати накожний тулярином для внутрішньошкірної проби і навпаки. Результати алергічної реакції враховують в динаміці через 24. 36, 48 ч. За позитивний результат приймають інфільтрат діаметром не менше 5 мм. У вакцинованих або перехворіли туляремією осіб протягом ряду років алергічні проби залишаються позитивними (анамнестична реакція).

Специфічна профілактика туляремії

Для специфічної профілактики застосовується щеплення проти туляремії, отримана в 1930 р вітчизняними військовими лікарями Б.Я. Ельберта і Н.А. Гайським з штаму Ме 15. Вакцина забезпечує міцний імунітет на 5-6 років при зараженні європейським і Голарктичної підвидами і ефективна проти американського різновиду збудника. Вакцинацію проводять за епідеміологічними показниками, а також лицям, які належать до груп ризику. Допускається одночасна вакцинація проти туляремії і бруцельозу; туляремії і чуми, а також проти туляремії і деяких інших інфекцій.

Неспецифічна профілактика туляремії така ж, як при інших зоонозах, і спрямована в першу чергу на боротьбу з гризунами.