Агрегація тромбоцитів із ристоцетином (Фактор фон Віллебранда)

Референтні значення (норма) активності фактора фон Віллебранда становлять 58-166%.

Фактор фон Віллебранда синтезується ендотеліальними клітинами та мегакаріоцитами. Він необхідний для нормальної адгезії тромбоцитів і має здатність подовжувати період напіввиведення фактора VIII. Плазмовий фактор згортання крові VIII – антигемофільний глобулін А – циркулює в крові у вигляді комплексу з трьох субодиниць, позначених як VIII-k (коагулююча одиниця), VIII-Ag (основний антигенний маркер) та VIII-vWF (фактор фон Віллебранда, пов'язаний з VIII-Ag). Вважається, що фактор фон Віллебранда регулює синтез коагуляційної частини антигемофільного глобуліну А (VIII-k) та бере участь у судинно-тромбоцитарному гемостазі.

Хвороба фон Віллебранда – це спадкове захворювання, що характеризується збільшенням часу кровотечі, зниженням активності ристоцетинового кофактора та зниженням (різною мірою) коагулянтної активності фактора VIII. Клінічні прояви захворювання подібні до проявів тромбоцитопатії. Однак у пацієнтів зі значним зниженням активності фактора VIII можуть виникати гематоми та гемартроз.

На основі лабораторних досліджень, що дозволяють визначити структуру та активність фактора фон Віллебранда, виділяють такі форми захворювання.

• Тип I (70% усіх випадків) характеризується незначним зниженням ристоцетинового кофактора (фактора фон Віллебранда) та коагулянтної активності (VIII-k) при нормальній макромолекулярній структурі фактора фон Віллебранда.
• Тип II: ґрунтується на селективному дефіциті високомолекулярних полімерів фактора фон Віллебранда внаслідок порушень у структурі цього білка.
  • Тип IIB спричинений посиленою взаємодією між фактором фон Віллебранда та тромбоцитами, а підвищений кліренс агрегатів тромбоцитів призводить до тромбоцитопенії.
• Тип III характеризується тяжким кількісним дефіцитом фактора фон Віллебранда, що призводить до клінічно значущого зниження активності фактора VIII (VIII-k).

Вміст фактора фон Віллебранда визначається у випадках, коли час кровотечі збільшений, кількість тромбоцитів знаходиться в межах референтних значень і немає очевидних причин порушення функції тромбоцитів. Для оцінки фактора фон Віллебранда визначається кількісний вміст фактора фон Віллебранда (дослідження активності кофактора ристоцетину), вивчається аглютинація тромбоцитів, індукована ристоцетином, та антигенна структура фактора фон Віллебранда, пов'язаного з фактором VIII (VIII-vWF).

Для кількісної оцінки фактора фон Віллебранда використовується визначення агрегації тромбоцитів з ристоцетином у плазмі. Встановлено лінійну залежність між ступенем агрегації ристоцетину та кількістю фактора фон Віллебранда. Метод базується на здатності цього антибіотика (ристоцетину) стимулювати in vitro взаємодію фактора фон Віллебранда з глікопротеїном Ib тромбоцитів. У більшості випадків хвороби фон Віллебранда спостерігається порушення агрегації ристоцетину при нормальній реакції на АДФ, колаген та адреналін. Порушення агрегації ристоцетину виявляється також при макроцитарній тромбодистрофії Бернара-Сульє (відсутність рецепторів агрегації ристоцетину на мембрані тромбоцитів). Для диференціації використовується тест з додаванням нормальної плазми: при хворобі фон Віллебранда агрегація ристоцетину нормалізується після додавання нормальної плазми, тоді як при синдромі Бернара-Сульє цього не відбувається.

Дослідження також може бути використане в диференціальній діагностиці гемофілії А (дефіцит фактора VIII) та хвороби фон Віллебранда. При гемофілії вміст VIII-k різко знижений, а вміст VIII-fB знаходиться в межах норми. Клінічно ця різниця проявляється тим, що при гемофілії виникає гематомний тип підвищеної кровотечі, а при хворобі фон Віллебранда — петехіально-гематомний.

Аглютинація тромбоцитів, індукована ристоцетином, знижена у більшості випадків хвороби фон Віллебранда, за винятком типу IIB.

Антигенна структура фактора фон Віллебранда, пов'язаного з фактором VIII (VIII-vWF), виявляється різними імунологічними методами, а розподіл фактора фон Віллебранда за розміром молекули визначається за допомогою електрофорезу в агарозному гелі. Ці тести використовуються для встановлення типу хвороби фон Віллебранда.

Дослідження агрегації тромбоцитів з різними індукторами проводиться не лише для виявлення порушень функцій агрегації тромбоцитів. Це дослідження дозволяє оцінити ефективність антиагрегантної терапії, підібрати індивідуальні дози препаратів та провести моніторинг препарату.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]