Макроскопічний аналіз сперми: що оцінюється

Макроскопічний аналіз сперми – це перша частина спермограми, яка оцінює властивості еякуляту без детального підрахунку сперматозоїдів під мікроскопом. Цей розділ зазвичай включає об’єм, зовнішній вигляд, ступінь розрідження, в’язкість, кислотність та, згідно з чинними рекомендаціями Всесвітньої організації охорони здоров’я, інформацію про будь-який незвичайний запах. Ці параметри є відправною точкою для лабораторної оцінки чоловічої репродуктивної функції. [1]

Макроскопічна частина зразка не відповідає на всі питання щодо фертильності, але вона дає важливі підказки щодо функції передміхурової залози, сім'яних міхурців, сім'явивідної протоки та точності збору зразка. Наприклад, невеликий об'єм зразка може бути пов'язаний з неповним збором, ретроградною еякуляцією, дефіцитом андрогенів або обструкцією, тоді як тривале розрідження та підвищена в'язкість можуть перешкоджати повній оцінці рухливості та концентрації сперматозоїдів. [2]

Сучасний підхід до аналізу сперми став більш обережним, ніж раніше. У 6-му виданні рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я особливо наголошується, що нижні референтні межі відображають 5-й процентиль у чоловіків, чиї партнерки завагітніли природним шляхом протягом 1 року, але ці значення не можна використовувати як єдину межу між «нормою» та «патологією». [3]

Це означає, що навіть «нормальний» макроскопічний аналіз не гарантує збереження фертильності, а окрема аномалія не обов’язково означає безпліддя. Найбільше клінічне значення має поєднання кількох аномалій, їх відтворюваність при повторному обстеженні та відповідність скаргам пацієнта, анамнезу хвороби та результатам обстеження. [4]

Особливо важливо зазначити, що параметри сперми є біологічно мінливими. Вони можуть змінюватися від тесту до тесту через тривалість утримання, лихоманку, нещодавні захворювання, помилки збору зразків, стрес та інші фактори. Тому чинні рекомендації рекомендують покладатися не на один результат, а принаймні на два тести, особливо якщо перший відхилено. [5]

Макроскопічна частина особливо корисна тим, що дозволяє швидко ідентифікувати ситуації, що потребують більш глибокого дослідження: низький об'єм та кисла реакція еякуляту у разі підозри на обструкцію, кров у спермі, тяжке порушення розрідження, ознаки забруднення сечі або гнильний запах, що необхідно зазначити в протоколі. [6]

Таблиця 1. Що входить до макроскопічного аналізу сперми

Індикатор	Що оцінюється?	Чому це важливо?
Обсяг	Скільки еякуляту було отримано	Допомагає запідозрити неповне скупчення, ретроградну еякуляцію, дефіцит андрогенів, обструкцію
Зовнішній вигляд	Однорідність, колір, каламутність	Може свідчити про низьку кількість сперматозоїдів, кров, домішки
Зрідження	Як швидко згусток стає рідким?	Важливо для руху сперматозоїдів та точності подальшого аналізу
В'язкість	Наскільки розтягується зразок після розрідження?	Підвищена в'язкість перешкоджає оцінці концентрації та рухливості
Кислотність	Реакція навколишнього середовища	Допомагає оцінити внесок сім'яних міхурців та передміхурової залози
Запах	Різкий незвичайний запах сечі або гниття	Може бути клінічно значущим і слід враховувати

Дані для таблиці базуються на 6-му виданні рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я та їх поточних переглядах. [7]

Як правильно підготуватися до дослідження

Підготовка до спермограми критично впливає на всі макроскопічні параметри. 6-те видання Всесвітньої організації охорони здоров'я дотримується того ж основного принципу: зразки збирають після 2-7 днів статевого утримання. Занадто короткий інтервал може зменшити об'єм еякуляту та загальну кількість сперматозоїдів, тоді як занадто довгий інтервал може спотворити порівнянність результатів між різними аналізами. [8]

Кращим методом отримання зразка є мастурбація, при цьому весь зразок збирається в чистий, нетоксичний контейнер. Неповний збір, особливо втрата першої фракції, може значно занизити об'єм зразка та змінити кінцевий аналіз. Тому лабораторія зазвичай з'ясовує, чи був якийсь зразок втрачений. [9]

Тест слід розпочати негайно. Поточна документація вказує на те, що тест бажано проводити протягом 30-60 хвилин після еякуляції. Це важливо для розрідження, кислотності та мікроскопічного аналізу. Якщо тест затримується занадто довго, рівень кислотності може бути штучно підвищений через втрату вуглекислого газу, що зробить властивості зразка менш порівнянними. [10]

Температура транспортування також важлива. Огляд 6-го видання рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я рекомендує температурний діапазон приблизно 20-27°C. Сильне охолодження, перегрів та тривале транспортування можуть погіршити якість зразків та ускладнити інтерпретацію результатів. [11]

Якщо мастурбація неможлива, у деяких випадках дозволяється використання спеціальних нетоксичних презервативів для збору сперми. Однак звичайні латексні презервативи для цієї мети не підходять, оскільки хімічні добавки можуть впливати на сперму. Це особливо важливо, коли аналіз планується як повна спермограма, а не лише візуальна оцінка еякуляту. [12]

На практиці це означає, що лікар оцінює не просто «біологію» пацієнта, а біологію плюс якість підготовки. Тому, якщо виявлено будь-яке неочікуване відхилення в макроскопічній частині, перше питання, яке потрібно поставити: чи була втрата еякуляту, чи пропущено вчасні пологи, чи спостерігалося утримання, чи була нещодавно лихоманка або лікування. Без цього навіть хороший лабораторний звіт може бути клінічно неправильно інтерпретований. [13]

Таблиця 2. Правила підготовки до макроскопічного аналізу сперми

Сцена	Сучасна рекомендація	Що станеться, якщо буде порушення?
Статеве утримання	2-7 днів	Результати між аналізами важче порівнювати
Збір матеріалів	Повністю зібрати всю порцію	Можливий хибно низький рівень гучності
Спосіб збору	Бажано мастурбацію	Випадкові домішки та втрати ускладнюють оцінку
Час до аналізу	30-60 хвилин	Кислотність та відтворюваність результатів спотворені
Температура доставки	Близько 20-27°C	Можливі зміни властивостей зразка
Повторний аналіз	Якщо є якісь відхилення, потрібно провести ще щонайменше одне тестування, бажано через 1 місяць.	Один результат може бути випадковим

Дані для таблиці базуються на рекомендаціях Всесвітньої організації охорони здоров'я, рекомендаціях Американського товариства репродуктивної медицини та рекомендаціях Американської урологічної асоціації.[14]

Які показники оцінюються макроскопічно?

Першим показником є об'єм еякуляту. Поточний огляд 6-го видання рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я показав, що нижній 5-й процентиль об'єму становить 1,4 мл з довірчим інтервалом 1,3-1,5 мл. Це не «магічне порогове значення», а статистичний орієнтир для чоловіків у фертильних парах. Нижче цього рівня ймовірність клінічно значущої причини зростає, але діагноз не ставиться лише на основі цього числа. [15]

Другим показником є розрідження. Відразу після еякуляції сперма зазвичай згортається, а потім стає більш рідкою. Згідно з рекомендаціями Всесвітньої організації охорони здоров'я, повне розрідження зазвичай відбувається протягом 15-30 хвилин за кімнатної температури. Якщо розрідження не завершене після 30 хвилин, це фіксується в протоколі; якщо воно не завершене після 60 хвилин, це також обов'язково відображається у звіті. [16]

Третім показником є в'язкість. Після завершення розрідження зразок повинен стікати окремими краплями. Якщо після аспірації в піпетку з широким отвором утворюється нитка довжиною понад 2 см, в'язкість вважається аномально підвищеною. Це не просто лабораторна деталь: висока в'язкість заважає повній оцінці концентрації, рухливості, антитіл та деяких біохімічних маркерів. [17]

Четвертий показник – кислотність. В еякуляті вона визначається співвідношенням кислої простатичної рідини до лужної рідини сім'яних міхурців. Всесвітня організація охорони здоров'я рекомендує вимірювати кислотність у стандартизований час, бажано через 30 хвилин після збору, але в будь-якому випадку не пізніше 1 години. Показник нижче 7,2 вважається клінічно значущим і може свідчити про дефіцит лужної рідини сім'яних міхурців або забруднення сечею. [18]

П'ятим показником є зовнішній вигляд. Нормальний розріджений еякулят зазвичай описується як однорідний та сірувато-опалесцентний. Менш виражена каламутність може виникати при дуже низькій кількості сперматозоїдів, а червонувато-коричневий відтінок вказує на кров у спермі. Сучасні огляди підкреслюють, що сам колір неспецифічний, але його слід описати, оскільки іноді він є першою ознакою проблеми. [19]

Шостим показником є запах. У 6-му виданні рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я було додано вимогу відзначати сильний запах сечі або гнильного запаху на додаток до макроскопічної оцінки. Однак сучасні автори спеціально зазначають, що цей параметр залишається суб'єктивним і має обмежене незалежне значення. Він корисний як додатковий сигнал, але не як окремий діагностичний критерій. [20]

Таблиця 3. Основні макроскопічні параметри та орієнтири

Індикатор	Що вважається еталоном?	Практичне застереження
Обсяг	Нижній 5-й процентиль приблизно 1,4 мл	Менший обсяг не автоматично дорівнює безпліддю.
Зрідження	Зазвичай 15-30 хвилин	Незавершені після 30 та 60 хвилин мають бути зафіксовані.
В'язкість	Нитка не довша за 2 см	Підвищена в'язкість перешкоджає подальшій оцінці
Кислотність	Клінічно значущим є, перш за все, значення нижче 7,2	Вимірювання необхідно проводити швидко та відповідно до стандарту.
Зовнішній вигляд	Однорідна, сірувато-опалесцентна	Сам колір неспецифічний.
Запах	Немає сильного запаху сечі або гнильного запаху	Параметр є суб'єктивним

Дані для таблиці базуються на 6-му виданні рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я та поточних оглядах інтерпретації аналізу сперми.[21]

Як інтерпретуються об'єм і кислотність

Низький об’єм еякуляту є одним із найважливіших клінічно важливих макроскопічних показників. Згідно з рекомендаціями Американського товариства репродуктивної медицини та Американської урологічної асоціації, а також лабораторними дослідженнями, це може бути пов’язано з неповним збором зразків, ретроградною еякуляцією, дефіцитом андрогенів, обструкцією сім’явивідних проток або вродженою відсутністю сім’явивідної протоки, а також недорозвиненням сім’яних міхурців.[22]

Поєднання низького об’єму та кислотності еякуляту є особливо важливим. Американські рекомендації чітко вказують, що об’єм менше 1,5 мл та кислотність нижче 7,0 слід розглядати як варіант дистальної обструкції чоловічих репродуктивних шляхів. У цій ситуації лікар зазвичай враховує трансректальне ультразвукове дослідження та анатомічні причини. [23]

З практичної точки зору це означає, що низький об'єм не можна оцінювати окремо. Якщо пацієнт повідомляє про втрату першого зразка, результати спочатку повторюють з правильним зразком. Якщо низькі об'єми повторюються, особливо у поєднанні з азооспермією, кислотністю та низькою кількістю сперматозоїдів, ймовірність структурної проблеми значно вищує. [24]

Високий об’єм еякуляту обговорюється рідше, але в рекомендаціях Всесвітньої організації охорони здоров’я зазначається, що це може відображати активну ексудацію через запалення додаткових статевих залоз. Однак, цей показник сам по собі є неспецифічним і його слід оцінювати разом зі скаргами пацієнта, кількістю лейкоцитів та мікроскопічним дослідженням. [25]

Кислотність еякуляту вимагає ретельної інтерпретації. У 6-му виданні Всесвітньої організації охорони здоров'я наголошується, що клінічний інтерес представляє низьке, а не високе значення. Це пояснюється тим, що вуглекислий газ поступово виходить зі зразка після еякуляції, тому значення може з часом зростати, а його занадто пізнє вимірювання знижує його діагностичну цінність. [26]

Ось чому старе правило «будь-яка висока лужність означає інфекцію» сьогодні звучить надто суворо. Для лікаря набагато важливішими є повторюваність результату, час вимірювання, кореляція з об’ємом, наявність лейкоцитів, скарги та інші лабораторні показники. Кислотність — це корисний орієнтир, але не самостійний діагноз. [27]

Таблиця 4. Що можуть означати зміни об'єму та кислотності

Знайти	Можливі причини	Що вони зазвичай роблять далі?
Об'єм менше 1,4 мл	Неповне збір, ретроградна еякуляція, дефіцит андрогенів, обструкція	Вони повторюють аналіз, уточнюють збір, а іноді досліджують сечу після еякуляції.
Дуже низький об'єм і мало або взагалі немає сперми	Непрохідність, вроджена відсутність сім'явивідної протоки	Поглиблене андрологічне обстеження
Низький об'єм та кислотність нижче 7,0	Дистальна обструкція, недостатність секреції сім'яних міхурців	Розгляньте візуалізацію та пошук анатомічної причини
Нормальний об'єм та кисла реакція	Можливі технічні помилки або забруднення сечею.	Повторне дослідження згідно зі стандартом
Збільшений обсяг	Іноді запалення додаткових статевих залоз	Порівняно зі скаргами та мікроскопією

Дані для таблиці базуються на рекомендаціях Американського товариства репродуктивної медицини, Американської урологічної асоціації та рекомендаціях Всесвітньої організації охорони здоров'я.[28]

Як інтерпретувати зовнішній вигляд, розрідження та в'язкість

Нормальний вигляд розрідженого еякуляту зазвичай описується як однорідний та сірувато-опалесцентний. Якщо зразок майже прозорий або незвично злегка каламутний, це може свідчити про дуже низьку кількість сперматозоїдів. Однак колір не слід інтерпретувати окремо від мікроскопії; він лише дає підказку щодо наступних кроків. [29]

Червонувато-коричневий або коричневий відтінок свідчить про кров у спермі або гемоспермію. Згідно з посібниками та довідниками, цей стан часто є доброякісним та тимчасовим, особливо у молодих чоловіків, але рецидиви у віці старше 40 років, що супроводжуються болем, лихоманкою або гематурією, потребують більш серйозного обстеження. [30]

Жовтий відтінок набагато менш специфічний. Він може бути пов'язаний з домішками сечі, ліками, вітамінами та, рідше, із запаленням. Тому сам по собі жовтий колір, без інших відхилень, не дозволяє поставити діагноз. Для клініциста важливішими є стійкість змін, скарги пацієнта та супутні лабораторні дані. [31]

Розрідження є ключовим функціональним параметром. Відразу після еякуляції сперма утворює згусток, який має стати більш рідким протягом 15-30 хвилин. Якщо цього не відбувається, зразок важче рівномірно перемішати, і сперматозоїди можуть залишатися «застряглими» в згустку. Це погіршує точність подальших оцінок концентрації та рухливості. [32]

Гіперв'язкість відрізняється від неповного розрідження. При справжній гіперв'язкості зразок залишається рівномірно липким після розрідження та розтягується в нитку довжиною понад 2 см. Всесвітня організація охорони здоров'я особливо наголошує, що висока в'язкість може перешкоджати оцінці рухливості, концентрації, антиспермальних антитіл та біохімічних маркерів. [33]

Також важливо зазначити, що спроби лабораторії «виправити» погане розрідження або високу в'язкість можуть змінити кінцеві властивості зразка. У рекомендаціях Всесвітньої організації охорони здоров'я зазначено, що додаткові механічні та ферментативні методи іноді дозволяють провести подальший аналіз, але вони впливають на характеристики еякуляту та повинні враховуватися під час інтерпретації. [34]

Таблиця 5. Як інтерпретуються зміни зовнішнього вигляду, розрідження та в'язкості

Знайти	Що це може означати?	Обмеження тлумачення
Майже прозорий еякулят	Можлива дуже низька кількість сперматозоїдів	Потрібна мікроскопія
Червонувато-коричневий колір	Кров у спермі	Необхідна клінічна оцінка та оцінка повторюваності.
Жовтий відтінок	Можлива домішка сечі, ліків та, рідше, запалення	Сам колір неспецифічний.
Неповне розрідження після 30 хвилин	Порушення розрідження, що впливає на подальший аналіз	Це має бути зафіксовано в протоколі
Відсутність розрідження після 60 хвилин	Більш серйозне порушення	Важливо обережно інтерпретувати весь аналіз.
Нитка більше 2 см	Підвищена в'язкість	Може перешкоджати оцінці концентрації уваги та рухливості

Дані для таблиці базуються на рекомендаціях Всесвітньої організації охорони здоров'я та поточних клінічних оглядах.[35]

Що може і не може сказати макроскопічний аналіз

Макроскопічна частина спермограми корисна, перш за все, для попередньої оцінки. Вона допомагає виявити підозру на обструкцію, ретроградну еякуляцію, запалення, забруднення крові, помилки збору зразків або фактори, що роблять мікроскопічний аналіз менш надійним. У цьому її велика цінність. [36]

Однак макроскопічний аналіз не може відповісти на фундаментальне питання про здатність сперматозоїдів запліднювати яйцеклітину. Для цього потрібні, як мінімум, дані про концентрацію сперматозоїдів, загальну кількість сперматозоїдів, рухливість, життєздатність та морфологію, а в деяких випадках – ретельне тестування. Згідно з чинними рекомендаціями, саме поєднання кількох аномалій збільшує ймовірність чоловічого безпліддя. [37]

Дуже важливим сучасним уточненням є те, що такі терміни, як «нормоспермія», більше не є такими центральними, як у старих рекомендаціях. 6-те видання Всесвітньої організації охорони здоров'я наголошує не на етикетках, а на стандартизованих описах конкретних параметрів та їх клінічного контексту. Це особливо важливо для макроскопічної частини, де спокуса спростити висновок особливо велика. [38]

Через природну мінливість еякуляту, один результат не слід вважати остаточним, особливо якщо він аномальний. Американське товариство репродуктивної медицини та Американська урологічна асоціація рекомендують проводити щонайменше два тести, бажано з інтервалом не менше одного місяця, якщо перший тест показує аномалії. Це правило особливо важливе у випадках малого об'єму, кислої реакції, гіперв'язкості та підозри на помилки збору. [39]

Отже, макроскопічний аналіз — це не «другорядна частина» спермограми, а основа належного протоколу. Але його сила полягає в поєднанні з іншими компонентами дослідження, а не в спробі поставити діагноз на основі одного кольору, одного мілілітра чи однієї смужки кислотності. [40]

Таблиця 6. Можливості та обмеження макроскопічного аналізу

Що допомагає помітити?	Що він не може встановити сам
Підозра на обструкцію	Кінцева причина безпліддя
Можлива помилка під час збору матеріалу	Якість морфології сперми
Розлад розрідження та гіперв'язкість	Повна оцінка фертильності
Домішка крові або сечі	Точна діагностика запалення без додаткових даних
Потреба в повторному аналізі	Придатність сперми для запліднення без мікроскопії

Дані для таблиці базуються на рекомендаціях Американського товариства репродуктивної медицини, Американської урологічної асоціації та Всесвітньої організації охорони здоров'я.[41]

Коли відхилення потребують поглибленого вивчення

Рецидивуючий низький об'єм еякуляту, особливо в поєднанні з азооспермією, кислотною реакцією та відсутністю або різким зниженням кількості сперматозоїдів, вимагає виключення дистальної обструкції, вродженої відсутності сім'явивідної протоки та ретроградної еякуляції. У таких випадках повторного макроскопічного опису вже недостатньо. [42]

Якщо в спермі з'являється кров, лікування залежить від віку пацієнта, симптомів та частоти виникнення. Ізольована гемоспермія у молодих чоловіків часто є доброякісною, але повторні епізоди, поєднання болю, лихоманки, гематурії або вік понад 40 років вимагають урологічного обстеження. [43]

Тривале розрідження та виражена гіпервіскозність самі по собі рідко дозволяють поставити остаточний діагноз, але вони мають клінічне значення, оскільки можуть спотворювати інші параметри аналізу сперми. Якщо такі аномалії повторюються, лікар оцінює стан додаткових статевих залоз, симптоми запалення та порівнює дані з кількістю лейкоцитів та мікробіологічними дослідженнями, якщо це показано. [44]

Різко незвичайний запах сечі вимагає виключення її забруднення, особливо якщо також виявлено низьку кислотність, малий об'єм або ознаки ретроградної еякуляції. Неприємний запах також слід зазначити в протоколі, хоча сам по собі він не є достатньою підставою для постановки діагнозу. [45]

Саме тому, після будь-якого стійкого відхилення макроскопічної частини, наступним кроком є не самолікування чи пошук «таблиці норм» в інтернеті, а повторний аналіз згідно зі стандартом та очна інтерпретація андрологом або урологом, який враховує анамнез, огляд та всі зрізи спермограми. [46]

Висновок

Макроскопічний аналіз сперми є базовою, але важливою частиною спермограми. Він оцінює об'єм, зовнішній вигляд, розрідження, в'язкість, кислотність та кілька додаткових характеристик, які допомагають визначити, чи зразок був зібраний правильно, і чи є ознаки обструкції, крові, аномальної секреції додаткових статевих залоз або технічних проблем під час дослідження. [47]

Поточні рекомендації рекомендують відійти від спрощеного підходу «норма чи патологія на основі одного числа». Нижчі референтні значення, включаючи об’єм приблизно 1,4 мл, є лише рекомендаціями, а не незалежними діагнозами. На практиці вирішальними є поєднання показників, повторюваність відхилень та загальний клінічний контекст. [48]

Найбільш клінічно значущими макроскопічними знахідками вважаються повторні еякуляти малого об'єму з високою кислотністю, відсутність розрідження, виражена гіпервязкость та кров у спермі. Ці знахідки найчастіше вимагають не просто повторного аналізу, а повного андрологічного або урологічного подальшого обстеження. [49]

Найчастіші запитання

Що таке макроскопічний аналіз сперми простими словами?
Це частина спермограми, де оцінюються зовнішні та фізичні властивості сперми: об'єм, колір та однорідність, час розрідження, в'язкість, кислотність та деякі додаткові характеристики. [50]

Який об'єм еякуляту вважається приблизно прийнятним згідно з сучасними даними?
Згідно з 6-м виданням рекомендацій Всесвітньої організації охорони здоров'я, нижній 5-й процентиль становить приблизно 1,4 мл. Однак це не абсолютна межа між фертильністю та безпліддям. [51]

Як довго сперма зазвичай повинна розріджуватися?
Повне розрідження зазвичай відбувається протягом 15-30 хвилин за кімнатної температури. Якщо розрідження не завершується після 30 хвилин, це фіксується; якщо воно не завершується після 60 хвилин, це також зазначається у звіті. [52]

Що означає підвищена в'язкість сперми?
Після розрідження зразок повинен стікати окремими краплями. Якщо утворюється нитка довша за 2 см, в'язкість вважається підвищеною. Це може перешкоджати точній оцінці концентрації та рухливості сперматозоїдів. [53]

Яка кислотність сперми вважається тривожною?
Низьке значення є найбільш клінічно значущим. Значення нижче 7,2 може свідчити про дефіцит лужної секреції сім'яних міхурців або забруднення сечею, тоді як поєднання низького об'єму та кислотності нижче 7,0 свідчить про обструкцію. [54]

Чи завжди жовта сперма є інфекцією?
Ні. Жовтий відтінок неспецифічний. Він може бути пов'язаний із забрудненням сечі, певними ліками та вітамінами, а іноді й із запаленням. Діагноз не можна поставити виключно на основі кольору. [55]

Чи завжди кров у спермі небезпечна?
Не завжди. У багатьох чоловіків, особливо молодих, гемоспермія є доброякісною та проходить сама по собі. Однак, якщо вона рецидивує, або якщо є біль, лихоманка, кров у сечі, або якщо вам більше 40 років, необхідне медичне обстеження. [56]

Чи достатньо однієї спермограми?
Якщо аналіз повністю нормальний, деякі рекомендації дозволяють вважати, що одного тесту може бути достатньо. Однак, якщо виникає будь-яке відхилення, сучасні рекомендації рекомендують повторити тест, зазвичай принаймні ще раз і бажано протягом одного місяця. [57]

Чи може неправильний збір зіпсувати результати?
Так. Втрата першої порції, порушення періоду утримання, тривалі терміни доставки та неправильна температура транспортування можуть суттєво спотворити макроскопічні результати. [58]

Чи може одне макроскопічне дослідження визначити, чи існує безпліддя?
Ні. Воно дає важливі підказки, але не замінює повну спермограму, повторні аналізи та клінічне обстеження спеціалістом. [59]