Антибиотикорезистентности мікроорганізмів: методи визначення

Антибіотики - одне з найбільших досягнень медичної науки, щорічно рятує життя десятків і сотень тисяч людей. Однак, як каже народна мудрість, і на стару буває помилка. Те, що раніше вбивало патогенних мікроорганізмів, сьогодні вже не працює так, як раніше. Так в чому ж причина: протимікробні препарати стали гірше або всьому провиною антибіотикорезистентності?

Визначення антибіотикорезистентності

Антимікробні препарати (АПМ), які прийнято називати антибіотиками, спочатку були створені для боротьби з бактеріальною інфекцією. А в зв'язку з тим, що різні хвороби може викликати не одна, а кілька різновидів бактерій, об'єднаних в групи, то спочатку велася розробка препаратів, ефективних щодо певної групи інфекційних збудників.

Але бактерії, хоч і найпростіші, але активно розвиваються організми, з часом набувають все нові і нові властивості. Інстинкт самозбереження і здатність пристосовуватися до різних умов життя роблять патогенних мікроорганізмів сильніше. У відповідь на загрозу для життя вони починають розвивати в собі здатності протистояти їй, виділяючи секрет, що послабляє або повністю нейтралізує дію активної речовини протимікробних препаратів.

Виходить, що дієві колись антибіотики просто-напросто перестають виконувати свою функцію. У цьому випадку говорять про розвиток антибіотикорезистентності до препарату. І справа тут зовсім не в ефективності діючої речовини АМП, а в механізмах удосконалення хвороботворних мікроорганізмів, завдяки яким бактерії стають не чутливими до антибіотиків, покликаним боротися з ними.

Отже, антибіотикорезистентності - це не що інше, як зниження сприйнятливості бактерій до протимікробних препаратів, які були створені для їх знищення. Саме з цієї причини лікування, здавалося б, правильно підібраними препаратами не дає очікуваних результатів.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Проблема антибіотикорезистентності

Відсутність ефекту від антибіотикотерапії, пов'язане з антибіотикорезистентністю, призводить до того, що хвороба продовжує прогресувати і переходить в більш важку форму, лікування якої стає ще більш складним. Особливу небезпеку становлять випадки, коли бактеріальна інфекція вражає життєво важливі органи: серце, легені, головний мозок, нирки і т.д., адже в цьому випадку зволікання смерті подібно.

Друга небезпека полягає в тому, що деякі хвороби при недостатності терапії антибіотиками можуть набувати хронічний перебіг. Людина стає носієм вдосконалених мікроорганізмів, стійких до антибіотиків певної групи. Він же тепер є джерелом інфекції, боротися з якою старими методами стає безглуздим.

Все це підштовхує фармацевтичну науку до винаходу нових, більш ефективних засобів з іншими діючими речовинами. Але процес знову йде по колу з розвитком антибіотикорезистентності вже до нових препаратів з розряду протимікробних засобів.

Якщо комусь здається, що проблема антибіотикорезистентності виникла зовсім недавно, він дуже помиляється. Ця проблема стара як світ. Ну, можливо не настільки, і все ж років 70-75 їй вже є. Відповідно до загальноприйнятої теорії, з'явилася вона разом з впровадженням в медичну практику перших антибіотиків десь в 40-х роках ХХ століття.

Хоча існує концепція більш ранньої появи проблеми резистентності мікроорганізмів. До появи антибіотиків цією проблемою особливо не займалися. Адже це так природно, що бактерії, як і інші живі істоти, намагалися пристосуватися до несприятливих умов навколишнього середовища, робили це по-своєму.

Проблема резистентності хвороботворних бактерій нагадала про себе, коли з'явилися перші антибіотики. Правда, тоді питання ще не стояло так актуально. У той період активно велися розробки різних груп антибактеріальних засобів, що в деякому роді було обумовлено несприятливою політичною обстановкою в світі, військовими діями, коли бійці вмирали від поранень і сепсису лише тому, що їм не могли надати ефективну допомогу через відсутність необхідних препаратів. Просто цих препаратів ще не існувало.

Найбільше число розробок велося в 50-60 роках ХХ століття, і протягом 2 наступних десятиліть велося їх удосконалення. Прогрес на цьому не закінчився, але починаючи з 80-х років розробок щодо антибактеріальних засобів стало помітно менше. Виною чи того велика затратність цього підприємства (розробка і випуск нового препарату в наш час доходить вже до кордону в 800 мільйонів доларів) або банальна відсутність нових ідей щодо «войовничо налаштованих» активних речовин для інноваційних препаратів, але в зв'язку з цим проблема антибіотикорезистентності виходить на новий лякаючий рівень.

Займаючись розробкою перспективних АМП та створюючи нові групи таких препаратів, вчені сподівалися перемогти множинні види бактеріальної інфекції. Але все виявилося не так просто «завдяки» антибіотикорезистентності, досить швидко розвивається в окремих штамів бактерій. Ентузіазм потроху вичерпується, але проблема так і залишається невирішеною довгий час.

Залишається незрозумілим, як може у мікроорганізмів розвиватися стійкість до препаратів, які по ідеї повинні були їх убити? Тут потрібно розуміти, що «вбивство» бактерій відбувається лише тоді, коли препарат застосовується за призначенням. А що ж ми маємо насправді?

Причини антибіотикорезистентності

Тут ми підійшли до головного питання, хто ж винен, що бактерії при впливі на них антибактеріальних засобів не вмирають, а прямо-таки перероджуються, набуваючи нових властивостей, які далеко не на руку людству? Що провокує такі зміни, що відбуваються з мікроорганізмами, які є причиною багатьох хвороб, з якими людство бореться не одне десятиліття?

Зрозуміло, що справжньою причиною розвитку антибіотикорезистентності є здатність живих організмів виживати в різних умовах, пристосовуючись до них різними шляхами. Але ж можливості ухилитися від смертельного снаряда в лиці антибіотика, який по ідеї повинен нести їм смерть, у бактерій немає. Так як же виходить, що вони не тільки виживають, але і вдосконалюються паралельно з удосконаленням фармацевтичних технологій?

Потрібно розуміти, що якщо є проблема (в нашому випадку розвиток антибіотикорезистентності у патогенних мікроорганізмів), значить є і провокуючі фактори, що створюють для неї умови. Якраз в цьому питанні ми зараз і спробуємо розібратися.

[7], [8], [9], [10], [11],

Фактори розвитку антибіотикорезистентності

Коли людина приходить до лікаря зі скаргами на здоров'я, він чекає від фахівця кваліфікованої допомоги. Якщо мова заходить про інфекції дихальних шляхів або інших бактеріальних інфекціях завдання лікаря призначити ефективний антибіотик, який не дасть хвороби прогресувати, і визначити необхідну для цієї мети дозування.

Вибір медикаментів у лікаря досить великий, але як визначити саме той препарат, який реально допоможе впоратися з інфекцією? З одного боку для виправданого призначення протимікробної препарату необхідно для початку з'ясувати тип збудника хвороби, згідно етіотропної концепції вибору препарату, яка вважається найбільш правильною. Але з іншого боку, на це може піти до 3 і більше днів, у той час найважливішою умовою успішного лікування вважається своєчасна терапія на ранніх термінах хвороби.

Лікарю нічого не залишається, як після постановки діагнозу діяти в перші дні практично навмання, щоб якось загальмувати хворобу і не дати їй пошириться на інші органи (емпіричний підхід). При призначенні амбулаторного лікування практикуючий лікар виходить із того, що збудником конкретної хвороби можуть бути певні види бактерій. Цим і обумовлений первісний вибір препарату. Призначення може зазнавати зміни в залежності від результатів аналізу на збудник.

І добре, якщо призначення лікаря підтвердиться результатами аналізів. В іншому випадку буде втрачено не тільки час. Справа в тому, що для успішного лікування є ще одна необхідна умова - повна дезактивація (у медичній термінології є поняття «іррадикації») патогенних мікроорганізмів. Якщо цього не відбувається, що вижили мікроби просто «перехворіють», і у них виробиться своєрідний імунітет до активної речовини протимікробної препарату, що викликав їх «хвороба». Це так само природно, як і вироблення антитіл в організмі людини.

Виходить, якщо антибіотик підібраний неправильно або неефективними виявляться режим дозування і прийому препарату, патогенні мікроорганізми можуть не загинути, а змінитися або придбати раніше не властиві їм можливості. Розмножуючись, такі бактерії утворюють цілі популяції штамів, стійких до антибіотиків конкретної групи, тобто антибіотикорезистентних бактерій.

Ще одним фактором, який негативно впливає на схильність патогенних мікроорганізмів впливу антибактеріальних препаратів, є використання АМП в тваринництві та ветеринарії. Застосування антибіотиків в цих областях не завжди виправдано. До того ж визначення збудника хвороби в більшості випадків не здійснюється або проводиться із запізненням, адже антибіотиками лікують в основному тварин, що знаходяться в досить важкому стані, коли все вирішує час, і чекати результати аналізів не представляється можливим. А в селі у ветеринара не завжди навіть така можливість є, ось він і діє «наосліп».

Але це б ще нічого, тільки є ще одна велика проблема - людський менталітет, коли кожен сам собі лікар. Причому, розвиток інформаційних технологій і можливість придбати більшість антибіотиків без рецепта лікаря лише посилюють цю проблему. А якщо врахувати, що некваліфікованих лікарів-самоучок у нас більше, ніж тих, хто суворо дотримується призначення і рекомендації лікаря, проблема набуває глобальних масштабів.

У нашій країні ситуація ускладнюється тим, що велика частина людей залишається фінансово неспроможними. У них немає можливості купувати ефективні, але дорогі препарати нового покоління. В такому випадку вони підміняють призначення лікаря дешевшими старими аналогами або препаратами, які порадила краща подруга або всезнаючий товариш.

«Мені допомогло, і тобі допоможе!» - хіба з цим посперечаєшся, якщо слова звучать з вуст навченого багатим життєвим досвідом сусіда, який війну пройшов? І мало хто замислюється, що завдяки таким як ми начитаним і довірливим, патогенні мікроорганізми вже давно пристосувалися виживати під дією рекомендованих в колишні часи препаратів. І те, що допомогло дідусеві 50 років тому, може виявитися неефективним в наш час.

А що вже говорити про рекламу і нез'ясовне бажанні деяких людей випробувати інновації на собі, як тільки трапиться відповідна за симптомами хвороба. І навіщо всі ці лікарі, якщо існують такі прекрасні препарати, про які ми дізнаємося з газет, екранів телевізорів і сторінок інтернету. Тільки текст з приводу самолікування вже так всім приївся, що на нього тепер мало хто звертає увагу. І дуже даремно!

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Механізми антибіотикорезистентності

Останнім часом антибіотикорезистентності стала проблемою номер один у фармакологічній промисловості, що займається розробкою протимікробних препаратів. Вся справа в тому, що вона властива практично всім відомим різновидам бактерій, в зв'язку з чим терапія антибіотиками стає все менш ефективною. Такі поширені патогенні мікроорганізми, як стафілококи, кишкова і синьогнійна паличка, протеї мають стійкі штами, які поширені більш своїх предків, схильних до дії антибіотиків.

Резистентність до різних груп антибіотиків, і навіть до окремих препаратів, розвивається по-різному. Старі добрі пеніциліни і тетрациклін, а також більш нові розробки у вигляді цефалоспоринів і аміноглікозидів характеризуються повільним розвитком антибіотикорезистентності, паралельно з цим знижується і їх терапевтичний ефект. Чого не можна сказати про такі препарати, діючою речовиною яких є стрептоміцин, еритроміцин, рімфампіцін і лінкоміцин. Резистентність до цих препаратів розвивається стрімким темпом, в зв'язку з чим призначення доводиться міняти навіть протягом курсу лікування, не чекаючи його закінчення. Те ж саме стосується препаратів олеандомицина і фузидин.

Все це дає підставу припустити, що механізми розвитку антибіотикорезистентності до різних препаратів значно відрізняються. Спробуємо розібратися, які властивості бактерій (природні або придбані) не дозволяють антибіотиків виробляти їх іррадикації, як це задумано спочатку.

Для початку визначимося з тим, що резистентність у бактерії може бути природного (захисні функції, даровані їй спочатку) і придбаної, про яку ми говорили вище. До сих пір ми в основному говорили про справжню антибіотикорезистентності, пов'язаної з особливостями мікроорганізму, а не з некоректним вибором або призначенням препарату (в цьому випадку мова йде про хибну антибіотикорезистентності).

Кожна жива істота, включаючи найпростіших, має своє неповторне будова і деякі властивості, що дозволяють йому виживати. Все це закладається генетично і передається з покоління в покоління. Природна резистентність до конкретних діючих речовин антибіотиків також закладена генетично. Причому у різних видів бактерій резистентність спрямована на певний вид препаратів, з чим і пов'язана розробка різних груп антибіотиків, які впливають на окремо взятий вид бактерій.

Фактори, які обумовлюють природну резистентність, можуть бути різними. Наприклад, структура білкової оболонки мікроорганізму може бути така, що антибіотика не під силу з ним впоратися. А адже антибіотиків під силу вплинути лише на білкову молекулу, руйнуючи її і призводячи до загибелі мікроорганізму. Розробка ефективних антибіотиків має на увазі облік будови білків бактерій, проти яких спрямована дія препарату.

Наприклад, антибіотикорезистентності стафілококів по відношенню до аміноглікозидів пов'язана з тим, що останні не можуть проникнути крізь мікробну оболонку.

Вся поверхня мікроба покрита рецепторами, з окремими видами яких і зв'язуються АМП. Мала кількість відповідних рецепторів або їх повна відсутність призводять до того, що зв'язування не відбувається, а значить і антибактеріальний ефект відсутній.

Серед інших рецепторів є і такі, які для антибіотика служать своєрідним маячком, що сигналізує про місцезнаходження бактерії. Відсутність таких рецепторів дозволяє мікроорганізму ховатися від небезпеки у вигляді АМП, що є своєрідною маскуванням.

У деяких мікроорганізмів є природна здатність активно виводити АМП з клітки. Така здатність називається Еффлюкс і вона характеризує резистентність синьогнійної палички щодо карбапенеми.

Біохімічний механізм антибіотикорезистентності

Крім перерахованих вище природних механізмів розвитку антибіотикорезистентності існує ще один, пов'язаний не з будовою бактеріальної клітини, а з її функціоналом.

Справа в тому, що в організмі бактерії можуть вироблятися ферменти, здатні чинити негативний вплив на молекули активної речовини АМП і знижувати його ефективність. Бактерії при взаємодії з таким антибіотиком теж страждають, їх дія помітно послаблюється, що створює видимість лікування від інфекції. Проте, пацієнт залишається носієм бактеріальної інфекції ще деякий час після так званого «одужання».

У цьому випадку ми маємо справу з модифікацією антибіотика, в результаті чого він стає неактивним щодо даного виду бактерій. Ферменти, що виробляються різними видами бактерій, можуть відрізнятися. Для стафілококів характерний синтез бета-лактамази, що провокує розрив лактемного кільця антибіотиків пеніцилінового ряду. Виробленням ацетилтрансферази можна пояснити стійкість до хлорамфеніколу грамнегативних бактерій і т.д.

[21], [22], [23]

Придбана антибіотикорезистентності

Бактеріям, як і іншим організмам, не чужа еволюція. У відповідь на «військові» дії в їх відношенні, мікроорганізми можуть змінювати свою структуру або почати синтезувати таку кількість ферментного речовини, яке здатне не тільки знижувати ефективність препарату, а й руйнувати його повністю. Наприклад, активне вироблення аланінтрансферази робить «Циклосерин» неефективним щодо бактерій, які продукують її у великих кількостях.

Антибиотикорезистентности може розвиватися і внаслідок модифікації в структурі клітини білка, який був водночас і її рецептором, з яким повинен зв'язуватися АМП. Тобто даний вид білка може бути відсутнім в бактеріальної хромосомі або змінити свої властивості, в результаті чого зв'язок між бактерією і антибіотиком стає неможливою. Наприклад, втрата або видозміна пеніцилінзв'язуючих білка стає причиною нечутливості до пеніцилінів і цефалоспоринів.

В результаті розвитку і активації захисних функцій у бактерій, раніше схильних до руйнівної дії певного виду антибіотиків, змінюється проникність клітинної мембрани. Це може бути здійснено за рахунок зменшення каналів, по яких діючі речовини АМП можуть проникнути всередину клітини. Саме ці властивістю обумовлена нечутливість стрептококів до бета-лактамних антибіотиків.

Антибіотики здатні впливати на клітинний метаболізм бактерій. У відповідь на це деякі мікроорганізми навчилися обходитися без хімічний реакцій, на які впливає антибіотик, що також є окремим механізмом розвитку антибіотикорезистентності, який вимагає постійного контролю.

Іноді бактерії йдуть на певну хитрість. Шляхом приєднання до щільної субстанції вони об'єднуються в співтовариства, іменовані біоплівки. В рамках спільноти вони є менш чутливими до антибіотиків і можуть спокійно переносити дозування, вбивчі для окремо взятої бактерії, що живе поза «колективу».

Ще один варіант - це об'єднання мікроорганізмів в групи на поверхні напіврідкої середовища. Навіть після поділу клітин частину бактеріальної «сім'ї» залишається всередині «угруповання», яка не піддається впливу антибіотиків.

[24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Гени антибіотикорезистентності

Існують поняття генетичної і негенетичної лікарської резистентності. З останньої ми маємо справу, коли розглядаємо бактерії з неактивним метаболізмом, не схильні до розмноження в звичайних умовах. У таких бактерій може вироблятися антибіотикорезистентності до певних видів препаратів, проте, їх потомству ця здатність не передається, оскільки вона не закладена генетично.

Це властиво патогенних мікроорганізмів, що викликають туберкульоз. Людина може заразитися і не підозрювати про хворобу довгі роки, поки його імунітет в силу якихось причин не дасть збій. Цією є поштовхом до розмноження мікобактерій і прогресуванню хвороби. Але для лікування туберкульозу використовуються всі ті ж препарати, вед бактеріальне потомство як і раніше залишається чутливим до них.

Точно так само йде справа і з втратою білка в складі клітинної стінки мікроорганізмів. Згадаймо, знову ж про бактеріях, чутливих до пеніциліну. Пеніциліни гальмують синтез білка, службовця для побудови клітинної оболонки. Під впливом АМП пеніцилінового ряду мікроорганізми можуть втрачати стінку клітин, будівельним матеріалом якої є пеніцилін білок. Такі бактерії стають резистентними до пеніцилінів і цефалоспоринів, яким тепер немає з чим зв'язуватися. Це явище тимчасове, не пов'язане з мутацією генів і передачею видозміненого гена у спадок. З появою клітинної стінки, властивої попереднім популяціям, антибіотикорезистентності у таких бактерій зникає.

Про генетичної антибіотикорезистентності кажуть, коли зміни в клітинах і метаболізмі всередині них відбуваються на рівні генів. Мутації генів можуть викликати зміни в структурі клітинної мембрани, провокувати вироблення ферментів, що захищають бактерії від антибіотиків, а також змінювати кількість і властивості рецепторів бактеріальної клітини.

Тут існує 2 шляхи розвитку подій: хромосомний і позахромосомних. Якщо відбувається мутація гена на тій ділянці хромосоми, який відповідає за чутливість до антибіотиків, говорять про хромосомної антибіотикорезистентності. Сама по собі така мутація виникає вкрай рідко, зазвичай її викликає дію ліків, але знову-таки не завжди. Контролювати це процес дуже складно.

Хромосомні мутації можуть передаватися з покоління в покоління, поступово формуючи певні штами (різновиди) бактерій, стійких до того чи іншого антибіотика.

Винуватцями позахромосомних резистентності до антибіотиків стають генетичні елементи, які існують поза хромосом і так звані плазміди. Саме ці елементи містять гени, відповідальні за вироблення ферментів і проникність бактеріальної стінки.

Антибиотикорезистентности найчастіше є результатом горизонтального переносу генів, коли одні бактерії передають деякі гени іншим, які не є їх нащадками. Але іноді можна спостерігати і незв'язані точкові мутації в геномі патогена (розмір 1 в 108 за один процес копіювання ДНК материнської клітини, що спостерігається при реплікації хромосом).

Так восени 2015 року вчені з Китаю описали ген MCR-1, виявлений в свинячому м'ясі і кишечнику свиней. Особливістю цього гена є можливість його передачі іншим організмам. Через деякий час цей же ген був знайдений не тільки в Китаї, але і в інших країнах (США, Англія, Малайзія, країни Європи).

Гени антибіотикорезистентності здатні стимулювати вироблення ферментів, які раніше не вироблялися в організмі бактерій. Наприклад, фермент NDM-1 (метало-бета-лактамаза 1), виявлений у бактерій Klebsiella pneumoniae в 2008 році. Спочатку він був виявлений у бактерій родом з Індії. Але в наступні роки фермент, що забезпечує антибіотикорезистентності щодо більшості АМП, був виявлений у мікроорганізмів і в інших країнах (Великобританія, Пакистан, США, Японія, Канада).

Патогенні мікроорганізми можуть проявляти стійкість як по відношенню до певних препаратів або груп антибіотиків, так і щодо різних груп препаратів. Існує таке поняття, як перехресна антибіотикорезистентності, коли мікроорганізми стають нечутливими до препаратів з подібним хімічною будовою або механізмом впливу на бактерії.

Антибиотикорезистентности стафілококів

Стафілококова інфекція вважається однією з найпоширеніших серед позалікарняних інфекцій. Втім, навіть в умовах стаціонару на поверхнях різних об'єктів можна виявити близько 45 різних штамів стафілокока. Це говорить про те, що боротьба з цією інфекцією є мало не першочерговим завданням медпрацівників.

Труднощі виконання цього завдання полягає в тому, що більшість штамів найбільш патогенних стафілококів Staphylococcus epidermidis і Staphylococcus aureus є резистентними до багатьох видів антибіотиків. І кількість таких штамів зростає з кожним роком.

Здатність стафілококів до множинних генетичних мутацій в залежності від умов проживання робить їх практично невразливими. Мутації передаються нащадкам і в короткі терміни з'являються цілі генерації стійких до антимікробних препаратів інфекційних збудників з роду стафілококів.

Найбільша проблема - це метіціллінорезістентние штами, які є стійкими не тільки до бета-лактамів (β-лактамних антибіотиків: певні підгрупи пеніцилінів, цефалоспоринів, карбапенемів і монобактами), а й іншим видам АМП: тетрацикліну, макролідів, лінкозамідів, аміноглікозидів, фторхінолонів, хлорамфеніколу.

Тривалий час знищити інфекцію можна було тільки за допомогою глікопептидів. В даний час проблема антибіотикорезистентності таких штамів стафілокока вирішується за допомогою нового виду АМП - оксазолідінонов, яскравим представником яких є лінезолід.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Методи визначення антибіотикорезистентності

При створенні нових антибактеріальних препаратів дуже важливо чітко визначити його властивості: як вони діють і стосовно яких бактерій ефективні. Визначити це можна лише за допомогою лабораторних досліджень.

Аналіз на антибіотикорезистентності можна провести з використанням різних методів, найпопулярнішими з яких вважаються:

• Метод дисків, або дифузія АМП в агар по Кірбі-Байєр
• Метод серійних розведень
• Генетична ідентифікація мутацій, що викликають лікарську резистентність.

Перший метод на сьогоднішній день вважається найпоширенішим завдяки дешевизні і простоті виконання. Суть методу дисків полягає в тому, що виділені в результаті досліджень штами бактерій поміщають в живильне середовище достатньої щільності і накривають просоченими розчином АМП паперовими дисками. Концентрація антибіотика на дисках відрізняється, тому коли відбувається дифузія препарату в бактеріальну середу, можна спостерігати градієнт концентрацій. За величиною зони відсутності росту мікроорганізмів можна судити про активність препарату і розрахувати ефективну дозування.

Варіантом методу дисків служить Е-тест. У цьому випадку замість дисків застосовують полімерні пластини, на які наноситься певна концентрація антибіотика.

Недоліками цих методів вважається неточність обчислень, пов'язана із залежністю градієнтаконцентрацій від різних умов (щільності середовища, температури, кислотності, вмісту кальцію і магнію і т.д.).

Метод серійних розведень заснований на створенні декількох варіантів рідкої або щільною середовища, що містять різні концентрації досліджуваного препарату. Кожен з варіантів заселяють певною кількістю досліджуваного бактеріального матеріалу. Після закінчення інкубаційного періоду оцінюють зростання бактерій або його відсутність. Цей метод дозволяє визначити мінімально-ефективну дозу препарату.

Метод можна спростити, взявши за зразок всього 2 середовища, концентрація яких буде максимально близька до мінімуму, необхідного для інактивації бактерій.

Метод серійних розведень по праву вважається золотим стандартом визначення антибіотикорезистентності. Але через дорожнечу і трудомісткості він не завжди застосуємо у вітчизняній фармакології.

Методика ідентифікації мутацій дає інформацію про наявність у того чи іншого штаму бактерій видозмінених генів, що сприяють розвитку антибіотикорезистентності до конкретних препаратів, і в зв'язку з цим систематизувати виникають ситуації з урахуванням подібності фенотипічних проявів.

Цей метод відрізняється високою вартістю тест-систем для його виконання, тим не менш, його цінність для прогнозування генетичних мутацій у бактерій незаперечна.

Якими б ефективними не були перераховані вище методи дослідження антибіотикорезистентності, вони не можуть повноцінно відобразити ту картину, яка розгорнеться в живому організмі. А якщо ще й врахувати той момент, що організм кожної людини індивідуальний, в ньому по-різному можуть проходити процеси розподілу і метаболізму лікарських засобів, експериментальна картина буває вельми далека від реальної.

Шляхи подолання антибіотикорезистентності

Як би не був хороший той чи інший препарат, але при наявному у нас ставлення до лікування, не можна виключати той факт, що в якийсь момент чутливість патогенних мікроорганізмів до нього може змінитися. Створення нових препаратів з тими самими дійовими речовинами теж ніяк не вирішує проблему антибіотикорезистентності. Та й до нових поколінь препаратів чутливість мікроорганізмів при частих невиправданих або некоректних призначеннях поступово слабшає.

Проривом в цьому плані вважається винахід комбінованих препаратів, які називають захищеними. Їх застосування обгрунтовано щодо бактерій, які продукують руйнівні для звичайних антибіотиків ферменти. Захист популярних антибіотиків здійснюється за рахунок включення до складу нового препарату спеціальних засобів (наприклад, інгібіторів ферментів, небезпечних для певного виду АМП), які усувають вироблення цих ферментів бактеріями і запобігають виведення препарату зі складу клітини за допомогою мембранного насоса.

Як інгібітори бета-лактамаз прийнято використовувати клавуланова кислота або сульбактам. Їх додають в бета-лактамних антибіотиків, завдяки чому підвищується ефективність останніх.

В даний час ведуться розробки препаратів, здатних впливати не тільки на окремо взяті бактерії, але і на ті, які об'єдналися в групи. Боротьбу з бактеріями в складі біоплівки можна вести лише після її руйнування і вивільнення організмів, перш пов'язаних між собою за допомогою хімічних сигналів. У плані можливості руйнування біоплівки вчені розглядають такий вид препаратів, як бактеріофаги.

Боротьба з іншими бактеріальними «угрупованнями» ведеться шляхом перенесення їх в рідку середу, де мікроорганізми починають існувати окремо, і тепер з ними можна боротися звичними препаратами.

Зіткнувшись з явищем резистентності в процесі лікування препаратом, лікарі вирішують проблему призначення різних препаратів, ефективних щодо виділених бактерій, але з різним механізмом впливу на патогенну мікрофлору. Наприклад, одночасно використовують препарати з бактерицидною і бактеріостатичну дію або замінюють один препарат іншим, з іншої групи.

Профілактика антибіотикорезистентності

Основним завданням антибіотикотерапії вважається повне знищення популяції хвороботворних бактерій в організмі. Це завдання можна вирішити лише шляхом призначення ефективних антимікробних препаратів.

Ефективність препарату відповідно визначається спектром його активності (включений в цей спектр виявлений збудник), можливостями подолання механізмів антибіотикорезистентності, оптимально підібраним режимом дозування, при якому відбувається загибель патогенної мікрофлори. Крім цього при призначенні препарату повинні враховуватися ймовірність розвитку побічних ефектів і доступність лікування для кожного окремо взятого пацієнта.

При емпіричному підході до терапії бактеріальних інфекцій врахувати всі ці моменти не представляється можливим. Потрібен високий професіоналізм лікаря і постійний моніторинг інформації про інфекції та ефективні препарати для боротьби з ними, щоб призначення не виявилося невиправданим і не привело до розвитку антибіотикорезистентності.

Створення оснащених високотехнологічним обладнанням медичних центрів дозволяє практикувати етіотропне лікування, коли спочатку в більш короткі терміни виявляють збудника, а потім проводиться призначення ефективного препарату.

Профілактикою антибіотикорезистентності можна вважати і контроль призначення препаратів. Наприклад, при ГРВІ призначення антибіотиків нічим не виправдане, зате сприяє розвитку антибіотикорезистентності мікроорганізмів, що знаходяться до пори до часу в «сплячому» стані. Справа в тому, що антибіотики можуть спровокувати ослаблення імунітету, що в свою чергу викличе розмноження бактеріальної інфекції, поховали всередині організму або потрапила в нього ззовні.

Дуже важливо, щоб призначаються препарати відповідали тієї мети, яку необхідно досягти. Навіть препарат, призначений в профілактичних цілях, повинен мати всі властивості, необхідні для знищення патогенної мікрофлори. Вибір препарату навмання може не тільки не дати очікуваного ефекту, а й погіршити ситуацію розвитком стійкості до препарату певного виду бактерій.

Особливу увагу варто приділити і дозуванні. Малі дози, неефективні для боротьби з інфекцією, знову-таки призводять до формування у хвороботворних мікроорганізмів антибіотикорезистентності. Але перестаратися теж не варто, адже при терапії антибіотиками велика ймовірність розвитку токсичних ефектів і анафілактичнихреакцій, небезпечних для життя пацієнта. Тим більше якщо лікування проводиться в амбулаторних умовах при відсутності контролю з боку медперсоналу.

За допомогою ЗМІ потрібно донести до людей всю небезпеку самолікування антибіотиками, а також незакінченого лікування, коли бактерії не гинуть, а лише стають менш активними з виробленим механізмом антибіотикорезистентності. Такий же ефект роблять і дешеві неліцензовані препарати, які нелегальні фармацевтичні компанії позиціонують як бюджетні аналоги вже існуючих препаратів.

Високоефективної заходом профілактики антибіотикорезистентності вважається постійний моніторинг існуючих інфекційних збудників і розвитку у них антибіотикорезистентності не тільки на рівні району або області, а й в масштабах країни (і навіть всього світу). На жаль, про це доводиться тільки мріяти.

На Україні системи інфекційного контролю як такої не існує. Прийнято лише окремі положення, одне з яких (ще 2007 года!), Що стосується акушерських стаціонарів, передбачає введення різних методів моніторингу внутрішньолікарняних інфекцій. Але все знову ж впирається у фінанси, і на місцях такі дослідження в основному не проводяться, не кажучи вже про лікарів з інших галузей медицини.

У Російській федерації до проблеми антибіотикорезистентності поставилися з більшою відповідальністю, і доказом тому є проект «Карта антимікробної резистентності Росії». Дослідженнями в цій області, збором інформації і її систематизації для наповнення карти антибіотикорезистентності займалися такі великі організації, як Науково-дослідний інститут антимікробної хіміотерапії, Міжрегіональна асоціація мікробіології і антимікробної хіміотерапії, а також Науково-методичний центр моніторингу антибіотикорезистентності, створений з ініціативи Федерального агентства з охорони здоров'я і соціальному розвитку.

Інформація, яку надає в рамках проекту, постійно оновлюється і доступна всім користувачам, кому необхідна інформація з питань антибіотикорезистентності і ефективного лікування інфекційних захворювань.

Розуміння того, наскільки актуальне на сьогоднішній день питання зниження чутливості хвороботворних мікроорганізмів і пошуку вирішення цієї проблеми, приходить поступово. Але це вже перший крок на шляху ефективної боротьби з проблемою на ім'я «антибіотикорезистентності». І цей крок дуже важливий.