Антитіла до нуклеарним антигенів (антинуклеарних фактор) в крові

У здорових людей титр антитіл до нуклеарним антигенів в сироватці крові 1: 40-1: 80 (клінічно значимий титр - ≥1: 160 при використанні методу непрямої імунофлюоресценції; при використанні скринінгових методів - нижче 1:50).

Антинуклеарних фактор - антитіла до цілісного ядра. Це гетерогенна група аутоантитіл, що реагують з різними компонентами ядра. Визначення антитіл до нуклеарним антигенів в сироватці крові - тест на системні захворювання сполучної тканини. Скринінг на наявність антинуклеарних антитіл в сироватці крові проводять методом радіоімунного аналізу (РІА), реакції зв'язування комплементу (РСК) або ІФА.

Позитивні результати скринінгу повинні бути підтверджені методом непрямої імунофлюоресценції. Як клітинного субстрату використовують препарати, приготовлені з суспензії клітин з великими ядрами [з людських клітин лінії НЕp-2 (human epithelial cells) - клітини раку гортані, або зрізів мишачої печінки]. Тип фарбування (характер розподілу флюоресцентной мітки в клітинах) при різних захворюваннях неоднаковий і визначає напрямок подальшого встановлення специфічності антинуклеарних антитіл.

• Дифузне фарбування (рівномірний розподіл мітки) найменш специфічно, можливо при системний червоний вовчак, лікарському волчаночном синдромі та інших аутоімунних захворюваннях, а також у літніх осіб. При дифузному фарбуванні клітин реакцію необхідно повторити з великим розведенням досліджуваної сироватки крові. Якщо тип фарбування залишається колишнім, найбільш ймовірно, що антиген проти якого спрямовані антинуклеарні антитіла, дезоксірібонуклеопротеіди.
• Гомогенне або периферичний фарбування спостерігають, коли в досліджуваній сироватці крові переважають антитіла до двухспіральной ДНК. Цей тип фарбування найбільш часто виявляють при системний червоний вовчак.
• Плямисте або крапчастий забарвлення обумовлено антитілами до екстрагуються ядерних антигенів і зазвичай спостерігається при змішаному захворюванні сполучної тканини, синдромі Шегрена, лікарському волчаночном синдромі.
• ЯДЕРЦЕВОГО (нуклеолярное) фарбування (розподіл мітки в районі ядерець) обумовлено антитілами до рибонуклеопротеидов (див. Нижче). Цей тип фарбування характерний для системної склеродермії, зрідка можливий і при інших аутоімунних захворюваннях.
• Центромерного або дискретне крапчатості фарбування обумовлено антитілами до центромере (спеціалізований домен хромосом) і характерно для CREST-синдрому та інших аутоімунних ревматичних захворювань.

Основна мета дослідження на антинуклеарні антитіла - виявлення системного червоного вовчака, оскільки при цьому захворюванні вони з'являються в сироватці крові 95% хворих протягом 3 міс після його початку.

Визначення антитіл до нуклеарним антигенів має велике значення для діагностики колагенозів. При вузликовому поліартеріїт титр (при використанні скринінгових методів) може збільшуватися до 1: 100, при дерматомиозите - до 1: 500, при системний червоний вовчак - до 1: 1000 і вище. При системний червоний вовчак тест на виявлення антинуклеарних фактора має високий ступінь чутливості (89%), але помірною специфічністю (78%) в порівнянні з тестом на визначення антитіл до нативної ДНК (чутливість 38%, специфічність 98%). Антитіла до нуклеарним антигенів високоспецифічні для системного червоного вовчака. Збереження високого рівня антитіл протягом тривалого часу - несприятлива ознака. Зниження титру віщує ремісію або (іноді) летальний результат.

При склеродермії частота виявлення антитіл до нуклеарним антигенів становить 60-80%, однак титр їх нижче, ніж при системний червоний вовчак. Між титром антинуклеарних фактора в крові і ступенем тяжкості захворювання взаємозв'язок не простежується. При ревматоїдному артриті часто виділяють ВКВ-подібні форми перебігу, тому досить часто виявляють антітелак нуклеарним антигенів. При дерматомиозите антитіла до ядерних антигенів в крові виявляють в 20-60% випадків (титр до 1: 500), при вузликовому поліартеріїт - в 17% (1: 100), при хворобі Шегрена - в 56% при поєднанні з артритом і 88% випадків при синдромі Гужеро-Шегрена. При дискоїдний червоний вовчак антинуклеарних фактор виявляють у 50% хворих.

Крім ревматичних захворювань, антитіла до ядерних антигенів в крові виявляють при хронічному активному гепатиті (в 30-50% випадків), причому їх титр іноді досягає 1: 1000. Аутоантитіла до нуклеарним антигенів можуть з'явитися в крові при інфекційному мононуклеозі, гострих і хронічних лейкозах, придбаної гемолітичної анемії, хвороби Вальденстрёма, цирозі печінки, біліарному цирозі печінки, гепатитах, малярії, лепрі, хронічної ниркової недостатності, тромбоцитопеніях, лімфопроліферативних захворюваннях, міастенії і Тімом.

Майже в 10% випадків антинуклеарних фактор виявляють у здорових людей, але в низькому титрі (не більше 1:50).

В останні роки був розроблений імуноферментний метод визначення антинуклеарних антитіл різного спектру, який відрізняється простотою виконання і поступово витісняє імунофлюоресцентним метод.

Цілий ряд ліків може призводити до хибнопозитивного підвищення титру антинуклеарних антитіл: аміносаліцілати, карбамазепін, ізоніазид, метилдопа, прокаїнамід, іодіди, оральні контрацептиви, тетрациклін, тіазидні діуретики, сульфаніламіди, ніфедипін, β-адреноблокатори, гідралазин, пеніциламін, нітрофурантоїн., Внаслідок здатності цих препаратів викликати інтерференцію при проведенні дослідження.

[1], [2], [3], [4],