Антитіла до нуклеарних антигенів (антинуклеарний фактор) у крові

У здорових людей титр антитіл до ядерних антигенів у сироватці крові становить 1:40-1:80 (клінічно значущий титр ≥1:160 при використанні методу непрямої імунофлуоресценції; при використанні методів скринінгу - нижче 1:50).

Антинуклеарний фактор – антитіла до всього ядра. Це гетерогенна група аутоантитіл, які реагують з різними компонентами ядра. Визначення антитіл до ядерних антигенів у сироватці крові є тестом на системні захворювання сполучної тканини. Скринінг на наявність антинуклеарних антитіл у сироватці крові проводиться за допомогою радіоімунологічного аналізу (РІА), реакції зв'язування комплементу (РЗК) або ІФА.

Позитивні результати скринінгу слід підтвердити методом непрямої імунофлуоресценції. Як клітинний субстрат використовуються препарати, приготовані із суспензії клітин з великими ядрами [з людських епітеліальних клітин лінії HEp-2 - клітин раку гортані, або зрізів печінки миші]. Тип забарвлення (характер розподілу флуоресцентної мітки в клітинах) різний для різних захворювань і визначає напрямок подальшого визначення специфічності антинуклеарних антитіл.

• Дифузне забарвлення (рівномірний розподіл мітки) є найменш специфічним, можливим при системному червоному вовчаку, синдромі лікарського вовчака та інших аутоімунних захворюваннях, а також у людей похилого віку. У разі дифузного забарвлення клітин реакцію необхідно повторити з більшим розведенням досліджуваної сироватки крові. Якщо тип забарвлення залишається тим самим, найімовірніше, що антигеном, проти якого спрямовані антинуклеарні антитіла, є дезоксирибонуклеопротеїн.
• Гомогенне або периферичне забарвлення спостерігається, коли в досліджуваній сироватці переважають антитіла до дволанцюгової ДНК. Такий тип забарвлення найчастіше зустрічається при системному червоному вовчаку.
• Плямисте або строкате забарвлення зумовлене антитілами до екстрагованих ядерних антигенів і зазвичай спостерігається при змішаних захворюваннях сполучної тканини, синдромі Шегрена та синдромі лікарського вовчака.
• Забарвлення ядерець (розподіл мітки в ядерцях) спричинене антитілами до рибонуклеопротеїну (див. нижче). Цей тип забарвлення типовий для системної склеродермії та іноді можливий при інших аутоімунних захворюваннях.
• Центромерне або дискретне плямисте забарвлення спричинене антитілами до центромери (спеціалізованого домену хромосом) і характерне для CREST-синдрому та інших аутоімунних ревматичних захворювань.

Головною метою дослідження на антинуклеарні антитіла є виявлення системного червоного вовчака, оскільки при цьому захворюванні вони з'являються в сироватці крові 95% пацієнтів протягом 3 місяців після його початку.

Визначення антитіл до ядерних антигенів має велике значення для діагностики колагенозів. При нодулярному поліартеріїті титр (за допомогою скринінгових методів) може зростати до 1:100, при дерматоміозиті - до 1:500, при системному червоному вовчаку - до 1:1000 і вище. При системному червоному вовчаку тест на виявлення антинуклеарного фактора має високий ступінь чутливості (89%), але помірну специфічність (78%) порівняно з тестом на виявлення антитіл до нативної ДНК (чутливість 38%, специфічність 98%). Антитіла до ядерних антигенів є високоспецифічними для системного червоного вовчака. Збереження високого рівня антитіл протягом тривалого часу є несприятливою ознакою. Зниження титру віщує ремісію або (іноді) летальний результат.

При склеродермії частота виявлення антитіл до ядерних антигенів становить 60-80%, але їх титр нижчий, ніж при системному червоному вовчаку. Немає зв'язку між титром антинуклеарного фактора в крові та тяжкістю захворювання. При ревматоїдному артриті часто виділяють ВКВ-подібні форми захворювання, тому антитіла до ядерних антигенів виявляються досить часто. При дерматоміозиті антитіла до ядерних антигенів у крові виявляються у 20-60% випадків (титр до 1:500), при вузликовому поліартеріїті - у 17% (1:100), при хворобі Шегрена - у 56% при поєднанні з артритом та у 88% випадків при синдромі Гужеро-Шегрена. При дискоїдному червоному вовчаку антинуклеарний фактор виявляється у 50% пацієнтів.

Окрім ревматичних захворювань, антитіла до ядерних антигенів у крові виявляються при хронічному активному гепатиті (у 30-50% випадків), а їх титр іноді досягає 1:1000. Аутоантитіла до ядерних антигенів можуть з'являтися в крові при інфекційному мононуклеозі, гострому та хронічному лейкозі, набутій гемолітичній анемії, хворобі Вальденстрема, цирозі печінки, біліарному цирозі, гепатиті, малярії, проказі, хронічній нирковій недостатності, тромбоцитопенії, лімфопроліферативних захворюваннях, міастенії та тимомах.

Майже в 10% випадків антинуклеарний фактор виявляється у здорових людей, але в низьких титрах (не більше 1:50).

В останні роки розроблено імуноферментний метод визначення антинуклеарних антитіл різних спектрів, який є простим у виконанні та поступово витісняє метод імунофлуоресценції.

Ряд препаратів може призвести до хибнопозитивного підвищення титру антинуклеарних антитіл: аміносаліцилати, карбамазепін, ізоніазид, метилдопа, прокаїнамід, йодиди, пероральні контрацептиви, тетрацикліни, тіазидові діуретики, сульфаніламіди, ніфедипін, β-адреноблокатори, гідралазин, пеніциламін, нітрофурантоїн тощо, через здатність цих препаратів викликати інтерференцію під час дослідження.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]