Брусельський

Бруцельоз - своєрідне інфекційне захворювання людей і тварин, що викликається бактеріями роду Brucella. У Росії щорічно реєструється близько 500 первинних захворювань людей на бруцельоз.

Людина заражається бруцельозом головним чином від домашніх тварин (вівці, кози, корови, свині, північні олені - головний резервуар збудника в природі). Бруцельоз існує давно і була описана під назвами, визначеними її географічним поширенням (мальтійська, неаполітанська, гібралтарська, середземноморська лихоманка).

Збудник відкритий в 1886 р Д. Брюсом, який виявив його в препараті з селезінки солдата, який помер від мальтійської лихоманки, і назвав мальтійським мікрококи - Micrococcus melitensis. Було встановлено, що основним носієм його є кози і вівці, а зараження відбувається при вживанні сирого молока від них. У 1897 р Б. Банг і Б. Стрібольт виявили збудника інфекційного аборту корів - Bacterium abortus bovis, а в 1914 р Дж. Траум відкрив збудника інфекційного аборту свиней - Brucella abortus suis. Проведене в 1916-1918 рр. А. Ивенс порівняльне вивчення властивостей Brucella melitensis і Brucella abortus bovis показало, що вони майже не відрізняються один від одного за багатьма властивостями. У зв'язку з цим було запропоновано об'єднати їх в одну групу, названу на честь Брюса - Brucella. У 1929 р І. Хеддльсона включив в цю групу Brucella abortus suis і запропонував рід Brucella розділити на 3 види: Brucella melitensis (Micrococcus melitensis), Brucella abortus (Brucella abortus bovis) і Brucella suis (Brucella abortus suis).

Захворювання людей і тварин, що викликається бруцеллами, було вирішено називати бруцельоз. В подальшому рід Brucella поповнився ще трьома видами: Brucella ovis виділено від баранів, які страждають епідідімітамі (1953), Brucella neotomae - від чагарникових щурів (1957) і Brucella canis - від гончих собак (1966). За класифікацією Берджи (2001), бруцели відносяться до класу Alphaproteobacteria.

[1], [2], [3], [4], [5],

Морфологія бруцелл

Бруцели володіють подібними морфологічними, тинкторіальних і культуральними властивостями. Вони являють собою грамнегативні дрібні кокковидной клітини діаметром 0,5-0,7 мкм і довжиною 0,6-1,5 мкм, розташовуються безладно, іноді парами, не мають джгутиків, не утворюють спор і капсул. Зміст Г + Ц в ДНК становить 56-58 мовляв%.

Біохімічні властивості бруцелл

Бруцели є аеробами або мікроаерофіламі, в анаеробних умовах не ростуть. Температурний оптимум для росту 36-37 ° С; рН 7,0-7,2; добре ростуть на звичайних поживних середовищах, але краще - з додаванням сироватки або крові. Рекомендовані середовища: живильний агар з додаванням сироватки (5%) і глюкози; агар, приготовлений на картопляному настої, з додаванням 5% сироватки; кров'яний агар; м'ясо-пептони бульйон. Особливістю Brucella abortus є потреба її в підвищеному вмісті С02 (5- 10%) в атмосфері зростання. Дуже характерний для бруцелл повільне зростання, особливо в перших генераціях: при посіві від людини і тварин зростання іноді з'являється через 2-4 тижні. Колонії бруцелл безбарвні, опуклі, круглі - S-форми, або шорсткі - R-форми, ніжні і прозорі спочатку, з віком мутніють.

Колонії Brucella canis, Brucella ovis та 5-го біотипів Brucella suis завжди мають R-форму. Зростання бруцелл в бульйонних середовищах супроводжується рівномірним помутнінням. Для зростання бруцелл необхідні тіамін, біотин, ніацин. Бруцели ферментують глюкозу і арабинозу з утворенням кислоти без газу, не утворюють індолу, відновлюють нітрати в нітрити. Утворення сірководню найбільш сильно виражено у Brucella suis.

В цілому у бруцелл за допомогою іммуноелектрофореза екстрактів, приготовлених із зруйнованих ультразвуком клітин, виявлено 10-14 антигенних фракцій. Бруцели мають загальний родоспеціфіческому антиген, різні інші соматичні антигени, в тому числі видоспецифічні М (переважає у Brucella melitensis), А (переважає у Brucella abortus) і R (у шорсткуватих форм). Антигени М і А виявляються також і у інших видів (биоваров) бруцелл, але в різних співвідношеннях, що необхідно враховувати при їх ідентифікації. Виявлено антигени, спільні з Francisella tularensis, Bordetella bronchiseptica і Y. Enterocolitica (серотип 09). У зв'язку з тим, що деякі ознаки у бруцелл варіюють, вид Brucella melitensis поділяють на 3 биовара, вид Brucella abortus - на 9 і В. Suis - на 5 биоваров. Для їх диференціації на види і біотипи і ідентифікації використовують комgлекс ознак, що включає в себе, крім морфологічних ітинкторіальних властивостей, також потреба в С02 для зростання, здатність рости на середовищах в присутності деяких барвників (основний фуксин, метіонін, сафранін), виділяти H2S, утворювати уреазу, фосфатазу, каталазу (активність цих ферментів найбільш сильно виражена у Brucella suis, вони ж не ростуть на середовищі з сафранін), чутливість до тбіліському бактеріофагу, аглютинація моноспецифічними сироватками. У разі необхідності використовують додаткові метаболічні тести: здатність окисляти деякі амінокислоти (аланін, аспарагін, глута-Мінова кислоту, орнітин, цитрулін, аргінін, лізин) і вуглеводи (арабинозу, галактозу, рибозу, D-глюкозу, D-ерітрітол, D-ксилозу ).

Четвертий біовар Brucella suis, оскільки його основним носієм не є свині, а північні олені, і з урахуванням інших його особливостей доцільно виділяти в якості самостійного виду Brucella rangiferis.

До п'ятого біовар В. Suis відносять культури, виділені від абортованих корів і овець і мають стійку R-форму бруцелл.

Ставлення бруцелл до тбіліському фагу: в звичайному робочому розведенні фаг лизирует тільки В. Abortus. Однак в дозі, рівній десяти робітникам, фаг лизирует, хоча і слабо, штами Brucella suis і Brucella neotomae.

[6], [7], [8], [9], [10], [11], [12]

Резистентність бруцелл

Бруцели мають відносно високу стійкість у зовнішньому середовищі. Вони зберігаються у вологому грунті і в воді до 2-3, а при температурі 11-13 "С - до 4,5 міс; в непроточних водоймах - до 3 міс; в молоці - до 273 днів; в маслі - до 142 днів; в сирі - до 1 року; в бринзі - до 72 днів; в кислому молоці - до 30 днів; в кефірі - до 11 днів. Однак вони дуже чутливі до високої температури - при 70 ° С гинуть через 10 хв, а при кип'ятінні - за кілька секунд. Пастеризація молока при 80-90 ° С призводить до їх загибелі через 5 хв. Бруцели чутливі також до різних хімічних дезінфектантів.

Фактори патогенності бруцелл

Бруцели не утворюють екзотоксину. Їх патогенність обумовлена ендотоксинів і здатністю пригнічувати фагоцитоз, запобігати «окислювальний вибух». Конкретні чинники, що пригнічують фагоцитоз, вивчені недостатньо. Патогенність бруцелл пов'язана також з гіалуронідазами і іншими ферментами. Суттєво важливим є те, що бруцели володіють найсильнішим алергенним властивістю, яке багато в чому визначає патогенез і клініку бруцельозу.

[13], [14], [15], [16],

Постінфекційний імунітет

Постінфекційний імунітет тривалий, міцний, але можливі повторні захворювання. Імунітет перехресний (проти всіх видів бруцел) і обумовлений Т-лімфоцитами і макрофагами. У імунних людей і тварин фагоцитоз носить завершеного характеру. Роль антитіл в імунітеті полягає в стимуляції фагоцитарної активності. Позитивна алергічна реакція свідчить не тільки про сенсибілізації організму, але і про наявність імунітету. Прорив імунітету може статися при інфікуванні великими дозами збудника або при його високої вірулентності.

Епідеміологія бруцельозу

Основними носіями бруцелл є вівці, кози (Brucella melitensis), велику рогату худобу (Brucella abortus), свині (Brucella suis) і північні олені (Brucella rangiferis). Однак вони можуть переходити і на багато інших видів тварин (яки, верблюди, буйволи, вовки, лисиці, гризуни, лами, сайгаки, бізони, коні, зайці, їжаки, кури і ін.). Особливо велику епідеміологічну небезпеку становить перехід Brucella melitensis на велику рогату худобу, так як в цьому випадку вона зберігає свою високу патогенність для людини. З усіх видів найбільш патогенним для людини в нашій країні є Brucella melitensis. Він служить причиною захворювання людей більш ніж в 95-97% всіх випадків бруцельозу. Brucella abortus, як правило, викликає латентну форму хвороби, і тільки в 1-3% відзначаються клінічні прояви. Ще рідше захворювання викликає Brucella suis (менше 1%). Патогенність бруцелл варіює в залежності не тільки від виду, але і від биовара. Зокрема, біовари 3, 6, 7, 9 Brucella abortus по вірулентності не поступаються Brucella melitensis. Американські варіанти Brucella suis є також високовірулентних, тому в різних країнах етіологічна роль окремих видів бруцел проявляється по-різному. Наприклад, в Мексиці основну роль в епідеміології бруцельозу грає Brucella melitensis, в США - Brucella suis, а в Канаді та деяких європейських країнах - Brucella abortus. He виключено, що біовари 3, 6, 7, 9 Brucella abortus виникли в результаті міграції на велику рогату худобу Brucella melitensis і її трансформації.

У тварин бруцельоз протікає у вигляді загального захворювання, картина якого буває різною. Для великої та дрібної рогатої худоби найбільш характерні прояви хвороби - інфекційні аборти, особливо якщо вони носять масовий характер. У свиней аборти відзначаються рідше, хвороба протікає як хронічний сепсис з ураженням суглобів, яєчок і інших органів. Від хворих тварин збудник виділяється з молоком, сечею, випорожненнями, гноєм і особливо рясно - в період викидня з плодом, навколоплідними оболонками і виділеннями з родових шляхів, які представляють найбільш заразливий матеріал. Рясне розмноження бруцел в оболонках плоду пов'язують з наявністю в них багатоатомного спирту - ерітрітол, який служить важливим фактором зростання для Брунелло всіх видів, крім Brucella ovis.

Людина заражається від тварин (від хворої людини вкрай рідко) головним чином контактним або контактно-побутовим шляхом (80-90% всіх захворювань). Аліментарний спосіб зараження спостерігається в основному при вживанні непастеризованого молока від хворих тварин або молочних продуктів, приготованих з нього, а також води. Контактним або контактно-побутовим способом можуть заразитися все лиця, які постійно або тимчасово мають справу з тваринами або твариною сировиною в силу своєї професії (пастухи, скотарі, доярки, ветеринарні Працівники та інші лиця). Бруцели при цьому проникають в організм людини через шкіру або, значно частіше, через слизові оболонки порожнини рота, носа, очі (заносяться брудними руками).

[17], [18], [19], [20], [21],

Симптоми бруцельозу

Інкубаційний період бруцельозу варіює від 1 тижня. До декількох місяців.

За лімфатичних шляхах збудник потрапляє в лімфатичні вузли; розмножуючись, утворює «первинний бруцеллезний комплекс», локалізація якого залежить від місця вхідних воріт, але найчастіше це лімфатичний апарат ротової порожнини, заглоткові, шийні, підщелепні залози і лімфатичний апарат кишечника. З лімфатичних вузлів збудник проникає в кров і поширюється по всьому організму, вибірково вражаючи тканини лімфо- гемопоетичної системи. Бактериемия і генералізація процесу призводять до сильної алергізації організму. Бруцельоз протікає як хрониосепсис. Це обумовлено незавершеним характером фагоцитозу. Перебуваючи і розмножуючись всередині клітин, в тому числі фагоцитів, бруцели виявляються недоступними ні для антитіл, ні для хіміопрепаратів. Крім того, вони можуть перетворюватися всередині клітин в L-форми і в такому вигляді тривалий час персистувати в організмі, а повертаючись в вихідну форму, викликати рецидив хвороби.

Симптоми бруцельозу дуже різноманітні і складні. Вони залежить перш за все від алергізації і інтоксикації організму і від того, які органи і тканини залучені в інфекційний процес. Найчастіше страждають лімфатична, судинна, гепатоліенального, нервова, і особливо опорно-рухова системи. Бруцельозу властиво тривалий перебіг (іноді до 10 міс), в важких випадках він може призводити до тривалої втрати працездатності та тимчасової інвалідності, але все ж хвороба, як правило, закінчується повним одужанням.

Лабораторна діагностика бруцельозу

Діагностика бруцельозу здійснюється за допомогою біологічної проби, бактеріологічного методу, серологічних реакцій, алергічної проби Бюрне і методу ДНК-ДНК гібридизації. Матеріалом для дослідження служать кров, кістковий мозок, кон'юнктивальний секрет, сеча, грудне молоко (у годуючих матерів), рідше - випорожнення, навколосуглобових рідина. Оскільки основним місцем перебування збудника в організмі є клітини гемо- або лімфопоетіческой систем, перевагу слід віддавати виділенню гемо- або міелокультури. При бактеріологічному дослідженні необхідно забезпечити умови для зростання Brucella abortus (потреба в С02). Ідентифікацію виділених культур бруцел проводять на підставі зазначених у табл. 30 ознак. До біологічної пробі (зараження морських свинок) вдаються в тому випадку, коли матеріал сильно забруднений сторонньої мікрофлорою і отримати безпосередньо з нього чисту культуру збудника важко. Серологічні реакції можуть бути використані або для виявлення антигенів збудника, або для виявлення антитіл до нього. Для виявлення бруцельозного антигенів, які можуть циркулювати в крові або у вільному вигляді, або у вигляді комплексів антиген + антитіло (ЦВК - циркулюючі імунні комплекси), використовують такі реакції: РПГА (особливо з використанням еритроцитарних діагностикумів із моноклональними антитілами до родоспеціфіческому антигену бруцелл); реакцію агрегат-гемаглютинації (рага); еритроцити несуть антитіла до бруцеллезним антигенів; реакції коагглютинации, преципітації і ІФМ. Для виявлення антитіл в сироватці хворого використовують: реакцію аглютинації Райта, реакцію Кумбса (для виявлення неповних антитіл), реакцію імунофлуоресценції в непрямому варіанті, РПГА, ІФМ, РСК, ОФР, а також прискорені реакції на склі: Хеддльсона, роз-бенгал, латекс аглютинації, непряму реакцію гемолізу (еритроцити, сенсибілізовані ЛПС бруцел, в присутності антитіл і комплементу лизируются).

Як запобігти бруцельоз?

Вакцина проти бруцельозу - специфічна профілактика бруцельозу. Вакцинація здійснюється за допомогою живої вакцини, приготовленої з штаму В. Abortus (жива бруцеллезная вакцина - ЖБВ), тільки в осередках козяче-овечого бруцельозу. Вакцина застосовується накожно, одноразово. Ревакцинацію проводять лише лицям, у яких проба Бюрне і серологічні реакції негативні. Оскільки ЖБВ володіє сильним алергенним дією, замість неї запропонована хімічна бруцеллезная вакцина (ХБВ), приготована з антигенів клітинної стінки бруцелл. Вона має високу імуногенність, але менш аллергенна. Суспензія вбитих бруцел (убита лікувальна вакцина) або ХБВ можуть бути використані для лікування хронічного бруцельозу (стимулюють формування постинфекционного імунітету).