ПЛР гепатиту С

HCV в матеріалі в нормі відсутній.

На відміну від серологічних методів діагностики вірусного гепатиту С, де виявляють антитіла до HCV, ПЛР дозволяє виявити наявність безпосередньо РНК HCV і кількісно виразити його концентрацію в досліджуваному матеріалі. Тест має видову специфічність і високу чутливість: десяти молекул РНК HCV в досліджуваному матеріалі досить для його виявлення. Виявлення антитіл до HCV підтверджує лише факт інфікування пацієнта, але не дозволяє судити про активність інфекційного процесу (про реплікації вірусу) і прогнозі захворювання. Крім того, антитіла до HCV виявляють як в крові хворих на гострий і хронічний гепатит, так і у тих пацієнтів, хто хворів і видужав, а нерідко антитіла в крові з'являються тільки через кілька місяців після появи клінічної картини захворювання, що ускладнює діагностику. Виявлення HCV в крові з використанням ПЛР - більш інформативний метод діагностики. Виявлення в ПЛР РНК HCV свідчить про виремии, дозволяє судити про реплікації вірусу в організмі і служить одним з критеріїв ефективності противірусної терапії. Виявлення РНК HCV за допомогою ПЛР на ранніх етапах розвитку вірусної інфекції на тлі повної відсутності будь-яких серологічних маркерів може служити найбільш раннім свідченням інфікування. Однак ізольоване виявлення РНК HCV на тлі повної відсутності будь-яких інших серологічних маркерів не може повністю виключити хибнопозитивний результат ПЛР. У таких випадках необхідна всебічна оцінка клінічних, біохімічних і морфологічних досліджень з повторним неодноразовим підтвердженням наявності інфекції ПЦР.

Велике значення має застосування методу ПЛР у хворих на хронічний вірусний гепатит С, так як у більшості з них відсутня кореляція між наявністю вірусної реплікації і активністю печінкових ферментів. У таких випадках тільки ПЛР дозволяє судити про наявність вірусної реплікації, особливо якщо кінцевий результат виражають кількісно. У більшості випадків захворювання зникнення з сироватки крові РНК HCV відбувається пізніше нормалізації печінкових ферментів, тому їх нормалізація не може служити підставою для припинення противірусного лікування.

Практично важливо для виявлення РНК HCV досліджувати методом ПЛР не тільки сироватку крові, але і лімфоцити, гепатобіоптатов. Віруси вдається виявити в 2-3 рази частіше в тканини печінки, ніж в сироватці крові. При оцінці результатів дослідження сироватки крові на РНК HCV слід пам'ятати, що виремия може носити флюктуирующий характер (як і зміна активності ферментів). Тому після позитивних результатів дослідження ПЛР можна отримати негативний результат і навпаки. У таких випадках для вирішення сумнівів краще дослідити гепатобіоптатов.

Виявлення РНК HCV в матеріалі за допомогою ПЛР використовують для таких цілей:

• дозвіл сумнівних результатів серологічних досліджень;
• диференціація вірусного гепатиту С від інших форм гепатиту;
• виявлення гострої стадії захворювання в порівнянні з перенесеної інфекцією або контактом; визначення стадії інфікованості новонароджених від серопозитивних по HCV матерів;
• контроль ефективності противірусного лікування.

Пацієнти з підозрою на вірусний гепатит С:

• донори;
• особи з факторами ризику;
• особи з підвищеною активністю АЛТ;
• пацієнти з гострим гепатитом

Всі вищевикладені особливості оцінки результатів і підходів до діагностики HCV з використанням ПЛР відносяться і до інших інфекцій.

Метод ПЛР дозволяє не тільки виявити РНК HCV в досліджуваному матеріалі, але і встановити його генотип. Визначення генотипу вірусу має велике значення для підбору пацієнтів з хронічним вірусний гепатит С до проведення лікування інтерфероном-альфа і рибавірином. Лабораторні показання до лікування хронічного вірусного гепатиту С інтерфероном альфа наступні:

• підвищення активності трансаміназ;
• наявність РНК HCV в крові;
• генотип 1 HCV;
• висока виремия в крові (більше 8 × 10 ⁵ копій / мл).

В даний час можна кількісно визначати зміст РНК HCV в сироватці крові методом ПЛР, що має велике значення для конроля за лікуванням інтерфероном альфа. Рівень віремії оцінюють наступним чином: при утриманні РНК HCV від 10 ² до 10 ⁴ копій / мл - слабка; від 10 ⁵ до 10 ⁷ копій / мл - середня, вище 10 ⁸ копій / мл - висока. При ефективному лікуванні рівень віремії знижується.

[1], [2], [3], [4]