Медичний експерт статті
Нові публікації
Саузерн-блоттінг
Останній перегляд: 05.07.2025
Весь контент iLive перевіряється медичними експертами, щоб забезпечити максимально можливу точність і відповідність фактам.
У нас є строгі правила щодо вибору джерел інформації та ми посилаємося тільки на авторитетні сайти, академічні дослідницькі інститути і, по можливості, доведені медичні дослідження. Зверніть увагу, що цифри в дужках ([1], [2] і т. д.) є інтерактивними посиланнями на такі дослідження.
Якщо ви вважаєте, що який-небудь з наших матеріалів є неточним, застарілим або іншим чином сумнівним, виберіть його і натисніть Ctrl + Enter.
Саузерн-блоттинг (розроблений Е. Саузерном та Р. Девісом у 1975 році) є основним методом, який зараз використовується для ідентифікації генів певного захворювання. Для цього ДНК екстрагують з клітин пацієнта та обробляють однією або кількома рестрикційними ендонуклеазами. Отримані фрагменти піддають електрофорезу, що дозволяє розділити їх за розміром (менші фрагменти швидше рухаються через пори гелю). Потім фрагменти переносять (передруковують) на нітроцелюлозний фільтр, на який нашаровується радіоактивно мічений зонд. Зонд зв'язується лише з комплементарною послідовністю. Потім за допомогою авторадиографії визначають положення потрібного фрагмента геномної ДНК на електроферограмі.
Гібридизацію з міченим ДНК-зондом препаратів ДНК або РНК, нанесених краплями на тверду матрицю без попереднього обмеження та електрофорезу, називають точковою або щілинною гібридизацією, залежно від конфігурації плями ДНК на фільтрі (відповідно кругла або довгаста).
[