Заузерн-Блотінг
Останній перегляд: 23.04.2024
Весь контент iLive перевіряється медичними експертами, щоб забезпечити максимально можливу точність і відповідність фактам.
У нас є строгі правила щодо вибору джерел інформації та ми посилаємося тільки на авторитетні сайти, академічні дослідницькі інститути і, по можливості, доведені медичні дослідження. Зверніть увагу, що цифри в дужках ([1], [2] і т. д.) є інтерактивними посиланнями на такі дослідження.
Якщо ви вважаєте, що який-небудь з наших матеріалів є неточним, застарілим або іншим чином сумнівним, виберіть його і натисніть Ctrl + Enter.
Саузерн-блот (розроблений Е. Саузерну і Р. Дейвісом в 1975 р) - основний метод, за допомогою якого в даний час виявляють гени певного захворювання. Для цього ДНК з клітин хворого екстрагують і обробляють однією з рестрикційних ендонуклеаз (або декількома). Отримані фрагменти піддають електрофорезу, який дозволяє розділити їх за розміром (фрагменти меншого розміру рухаються через пори гелю швидше). Потім фрагменти переносять (передруковують) на нітроцелюлозний фільтр, на який нашаровуються мічений радіоактивною міткою зонд. Зонд зв'язується тільки з комплементарної послідовністю. Потім методом авторадиографии визначають положення шуканого фрагмента геномної ДНК на електрофореграмме.
Гібридизацію з міченим ДНК-зондом препаратів ДНК або РНК, нанесених крапельно на твердий матрикс без попередньої рестрикції і електрофорезу, носить назву дот- або слот-гібридизації в залежності від конфігурації плями ДНК на фільтрі (округлої або довгастої відповідно).
[