Гібридизація in situ
Останній перегляд: 23.04.2024
Весь контент iLive перевіряється медичними експертами, щоб забезпечити максимально можливу точність і відповідність фактам.
У нас є строгі правила щодо вибору джерел інформації та ми посилаємося тільки на авторитетні сайти, академічні дослідницькі інститути і, по можливості, доведені медичні дослідження. Зверніть увагу, що цифри в дужках ([1], [2] і т. д.) є інтерактивними посиланнями на такі дослідження.
Якщо ви вважаєте, що який-небудь з наших матеріалів є неточним, застарілим або іншим чином сумнівним, виберіть його і натисніть Ctrl + Enter.
Процедуру гібридизації можна проводити не тільки на гелі, на фільтрах або в розчині, а й на гістологічних або хромосомних препаратах. Цей метод носить назву гібридизації in situ. Варіант методу, при якому в якості зондів використовують препарати ДНК або РНК, мічені флюорохромами, називається FISH (fluorescein in situ hybradization). Мічений ДНК-зонд наносять на препарати диференційно забарвлених і підготовлених для гібридизації (денатурованих) метафазних хромосом. Попередня обробка хромосом застосовується для полегшення доступу зонда до геномної ДНК. Після відмивання незв'язаних молекул ДНК і нанесення світлочутливої емульсії (при використанні радіоактивності), або проведення відповідної обробки (при використанні біотін- або флюоресцеин-мічених ДНК-зондів) місця локалізації послідовностей ДНК, комплементарних використовуваному ДНК-зонду, можна безпосередньо виявляти при мікроскопії в вигляді характерних точок над відповідними ділянками певних хромосом.
Даний метод дослідження дозволяє визначити не тільки хромосомну приналежність, а й внутріхромосомную локалізацію досліджуваного гена.
[