Інфекційний мононуклеоз: антитіла до вірусу Епстайна-Барр у крові

Інфекційний мононуклеоз – поширене системне лімфопроліферативне захворювання, яке найчастіше викликається вірусом Епштейна-Барр. Toxoplasma gondii та інші віруси (ЦМВ, вірус імунодефіциту людини та вірус герпесу людини 6 типу, визнаний причиною раптової екзантеми) можуть спричиняти клінічно подібні захворювання. Ці ж етіологічні агенти, ймовірно, можуть спричиняти розвиток синдрому хронічної втоми.

Вірус Епштейна-Барр – це герпесвірус, що має тропізм до В-лімфоцитів і тривалий час зберігається в клітинах хазяїна як латентна інфекція. Він поширений по всьому світу. За структурою та розмірами вірус Епштейна-Барр не відрізняється від інших герпесвірусів, але суттєво відрізняється від них антигенними властивостями. Вірус має мембранний антиген (MA – мембранний антиген), ядерний антиген (EBNA – нуклеїновий антиген Епштейна-Барр) та антиген вірусного капсиду (VCA – антиген вірусного капсиду).

Зараження відбувається при передачі вірусу зі слиною. Коли вірус Епштейна-Барр потрапляє в організм, він інфікує епітелій глотки, викликаючи запалення та лихоманку – типові клінічні ознаки початку інфекційного мононуклеозу. Вірус є суворо лімфотропним, прикріплюючись до рецептора C3α клітинної мембрани B-лімфоцитів, він викликає проліферацію поліклональних B-лімфоцитів з відповідним збільшенням мигдаликів, системною лімфаденопатією та спленомегалією. B-лімфоцити трансформуються (набувають здатності до нескінченного поділу), і за відсутності адекватної клітинної імунної відповіді цей процес може перерости в явно злоякісний (наприклад, при Х-зв'язаному лімфопроліферативному синдромі). Якщо фактори клітинного імунітету контролюють реплікацію вірусу Епштейна-Барр в організмі, клінічні симптоми інфекційного мононуклеозу поступово зникають.

Як і інші герпесвіруси, ВЕБ може персистувати як латентна інфекція (його ДНК міститься в ядрі невеликої кількості В-лімфоцитів). Зрідка трапляється безсимптомна реактивація інфекції, приблизно у 20% здорових молодих людей ВЕБ виділяється зі слиною. У людей з порушеним клітинним імунітетом (наприклад, у хворих на СНІД, атаксію-телеангіектазію, реципієнтів трансплантатів) може розвинутися явна реактивна інфекція з волохатою лейкоплакією, інтерстиціальним пневмонітом або моноклональною В-клітинною лімфомою. ВЕБ пов'язаний з етіологією назофарингеальної карциноми та лімфоми Беркітта.

Одним із проявів інфекційного мононуклеозу є поява атипових лімфоцитів у периферичній крові (до 10% від загальної кількості лімфоцитів). Атипові лімфоцити виявляються в крові з початку періоду клінічних проявів інфекції. Їх вміст у крові досягає піку до кінця 2-го або початку 3-го тижня і може залишатися на цьому рівні до 1,5-2 місяців, повне зникнення зазвичай настає до початку 4-го місяця від початку захворювання. Наявність атипових лімфоцитів є відносно нечутливою ознакою інфекції, спричиненої вірусом Епштейна-Барр, але має загальну специфічність близько 95%.

Проліферація поліклональних В-лімфоцитів при інфекції, спричиненій вірусом Епштейна-Барр, генерує в організмі пацієнта велику кількість різноманітних аутоантитіл, таких як IgM анти-i (холодовий аглютинін), ревматоїдний фактор, антинуклеарні антитіла. Більшість незвичайних Ig, що з'являються при інфекційному мононуклеозі, називаються гетерофільними антитілами Поля-Баннелла. Ці антитіла належать до класу IgM, вони мають спорідненість до еритроцитів овець та коней і не спрямовані на жодні антигени вірусу Епштейна-Барр. Гетерофільні антитіла є випадковим продуктом проліферації В-лімфоїдів (викликаної вірусом Епштейна-Барр), вони з'являються в перший тиждень інфекційного мононуклеозу та поступово зникають під час одужання, зазвичай не виявляються через 3-6 місяців.

У міру того, як початкова гостра стадія інфекції переходить у латентну форму, геноми вірусу Епштейна-Барр (унікальні антигени) з'являються у великій кількості у всіх клітинах, а ядерний антиген вивільняється в навколишнє середовище. У відповідь на антиген синтезуються специфічні антитіла – цінні маркери стадії захворювання. Невдовзі після інфікування B-лімфоцити виявляють ранній антиген (РАН), білок, необхідний для реплікації вірусу Епштейна-Барр (а не структурний вірусний компонент). В організмі пацієнта синтезуються антитіла класів IgM та IgG до раннього антигену. Разом з повним віріоном вірусу Епштейна-Барр з'являються вірусні капсидні антигени (ВКА) та мембранний антиген (МАН). У міру стихання інфекційного процесу невеликий відсоток інфікованих вірусом Епштейна-Барр B-лімфоцитів уникає імунного руйнування та зберігає вірусний геном у латентній формі. Ядерний антиген вірусу Епштейна-Барр (ЯБНА) відповідає за його дуплікацію та виживання.

Лабораторні дослідження можуть виявити антитіла до різних антигенів.

З серологічних методів діагностики інфекційного мононуклеозу найпоширенішим є реакція Поля-Баннелла (аглютинація), спрямована на виявлення гетерофільних антитіл у сироватці крові. Титр гетерофільних антитіл 1:224 або вище в сироватці крові пацієнта визнається діагностично значущим, що підтверджує діагноз інфекційного мононуклеозу. Гетерофільна аглютинація позитивна у 60% молодих людей через 2 тижні та у 90% через 4 тижні від початку клінічних проявів захворювання. Тому для діагностики інфекційного мононуклеозу необхідно провести кілька досліджень: у перший тиждень захворювання (реакція може бути негативною) та через 1-2 тижні (реакція може стати позитивною). Вміст гетерофільних антитіл знижується в кінці гострого періоду інфекційного процесу, але їх титр можна визначити протягом 9 місяців після початку клінічних симптомів. Реакція Поля-Баннелла може перейти з позитивної на негативну навіть на тлі залишкових гематологічних та клінічних симптомів у пацієнта. Чутливість методу у дорослих становить 98%, специфічність – 99%. У дітей з інфекційним мононуклеозом до 2 років гетерофільні антитіла виявляються лише у 30% пацієнтів, у віці 2-4 років – у 75%, старше 4 років – понад 90%. Чутливість методу у дітей менше 70%, специфічність – 20%. Зниження, а потім повторне підвищення титру гетерофільних антитіл може відбуватися у відповідь на іншу інфекцію (найчастіше при вірусних інфекціях верхніх дихальних шляхів). Реакція Поля-Баннелла неспецифічна для вірусу Епштейна-Барр. Титр гетерофільних антитіл не реагує перехресно та не корелює зі специфічними антитілами до вірусу Епштейна-Барр, також немає кореляції з тяжкістю захворювання. Тест марний для діагностики хронічного інфекційного мононуклеозу (він позитивний у середньому лише у 10% пацієнтів).

Титри 1:56 і менше можуть бути виявлені у здорових людей та у пацієнтів з іншими захворюваннями (ревматоїдний артрит, краснуха). Хибнопозитивні результати тесту трапляються дуже рідко.

Наразі для визначення антитіл до еритроцитів барана використовується метод «одної плями» (аглютинація на предметному склі); спочатку його використовують як скринінговий тест. За чутливістю він порівнянний з реакцією Поля-Баннелла. Тести на предметному склі можуть бути хибнопозитивними приблизно у 2% досліджень (при лейкемії, злоякісній лімфомі, малярії, краснусі, вірусному гепатиті, раку підшлункової залози), а хибнонегативними у дорослих – у 5-7% випадків.

Слід зазначити, що асортимент діагностичних тест-систем, що випускаються компаніями, заснованих на визначенні титрів антитіл, дуже широкий, тому необхідно орієнтуватися на діагностичний титр антитіл, зазначений в інструкціях до тест-систем.

Якщо гетерофільні антитіла не виявлені, а клінічна картина захворювання відповідає інфекційному мононуклеозу, необхідно дослідити сироватку крові на наявність специфічних антитіл класів IgM та IgG. Для виявлення специфічних антитіл до вірусу Епштейна-Барр використовуються методи непрямої імунофлуоресценції (дозволяють виявити антитіла до антигенів EA та VCA), антикомплементної імунофлуоресценції (виявляє антитіла до антигенів EA, VCA та EBNA) та ІФА.

Антитіла до компонента D антигену EA (анти-EA-D) з'являються ще в латентний період первинної інфекції та швидко зникають з одужанням.

Антитіла до R-компонента антигену EA (анти-EA-R) можна виявити через 3-4 тижні після клінічних проявів захворювання. Вони зберігаються в сироватці крові близько року і часто виявляються при атиповому або затяжному інфекційному мононуклеозі. Ці антитіла зазвичай виявляються при лімфомі Беркітта.

Антитіла до VCA класу IgM (анти-VCA IgM) з'являються дуже рано, зазвичай до появи клінічних симптомів, вони виявляються на початку захворювання у 100% випадків. Високі титри виникають через 1-6 тижнів від початку інфекції, вони починають знижуватися з 3-го тижня і зазвичай зникають через 1-6 місяців. Анти-VCA IgM майже завжди присутні в сироватці крові під час активної інфекції, тому метод їх виявлення є дуже чутливим і специфічним для гострого епізоду інфекційного мононуклеозу.

Антитіла до класу IgG VCA (анти-VCA IgG) можуть з'являтися рано (на 1-4 тижні), їх кількість досягає піку до 2-го місяця захворювання. На початку захворювання вони виявляються у 100% випадків. Лише у 20% пацієнтів спостерігається 4-кратне збільшення титру при дослідженні парних сироваток. Титр знижується під час одужання, але виявляється протягом кількох років після інфікування, тому він марний для діагностики інфекційного мононуклеозу. Наявність анти-VCA IgG свідчить про стан після перенесеної інфекції та імунітет.

Антитіла до EBNA (анти-EBNA) з'являються останніми, рідко присутні в гострій фазі захворювання. Їх вміст зростає в період одужання (протягом 3-12 місяців), вони можуть залишатися в крові протягом багатьох років після захворювання. Відсутність анти-EBNA за наявності анти-VCA IgM та анти-EA IgM свідчить про поточну інфекцію. Виявлення анти-EBNA після попередньої негативної реакції вказує на існуючу інфекцію. За допомогою методу ІФА можна одночасно визначити наявність анти-EBNA класів IgM та IgG. Якщо кількість анти-EBNA IgM більша за анти-EBNA IgG, слід говорити про гостру інфекцію, при протилежному співвідношенні - про раніше перенесену.

Наявність однієї або кількох із наступних ознак вказує на гостре первинне зараження:

• анти-VCA IgG (виявляються рано, а пізніше вміст знижується);
• високий титр (більше 1:320) або 4-кратне збільшення титру IgG проти VCA протягом перебігу захворювання;
• тимчасове підвищення титру антитіл до EA-D (1:10 або більше);
• рання поява антитіл IgG до VCA без антитіл до EBNA, а пізніше поява антитіл до EBNA.

Гостра або первинна інфекція, спричинена вірусом Епштейна-Барр, виключається, якщо титри анти-VCA IgG та анти-EBNA у сироватці крові не змінюються при динамічному дослідженні (протягом гострого періоду та під час одужання).

Стійка присутність раннього антигену та анти-VCA IgG у високих титрах вказує на хронічну фазу інфекції.

Виявлення антитіл до вірусу Епштейна-Барр використовується для діагностики інфекційного мононуклеозу та хронічних інфекцій, спричинених вірусом Епштейна-Барр.

Антитіла до вірусу Епштейна-Барр можуть бути виявлені при таких захворюваннях: вторинні імунодефіцитні стани, включаючи ВІЛ-інфекцію, рак носоглотки, лімфому Беркітта, ЦМВ-інфекцію, сифіліс, хворобу Лайма, бруцельоз тощо.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]