Аналіз крові на наявність ракових клітин в організмі: назва, як здати

Сьогодні в медицині все частіше стикаються з онкологічними захворюваннями. Незважаючи на широке поширення ракових пухлин, механізм їх утворення і поширення як і раніше залишається невивченим. Поширення онкологічних захворювань відбувається з неймовірною швидкістю. Найчастіше цим захворюванням піддаються люди пенсійного віку. Але якщо раніше це захворювання вважалося переважно хворобою старшого покоління, то сьогодні відзначається тенденція до омолодження захворювання. До цього захворювання схильні і молоді люди, і підлітки і навіть маленькі діти. Небезпека полягає в тому, що ракові пухлини здатні вражати абсолютно будь-які органи. Вони ростуть, і в певний момент клітина відривається, потрапляє в іншу тканину, прикріплюється. В результаті утворюється нова пухлина (метастазу). Розвиток пухлин і виникнення метастаз можна запобігти, якщо вчасно виявити пухлину і вжити необхідних заходів. Аналіз на ракові клітини  грає провідну роль в ранній діагностиці злоякісних пухлин.

Аналізи дають можливість виявити пухлину, діагностувати її, а головне - своєчасно відреагувати. На ранніх етапах розвиток ще можна запобігти. Але найчастіше пухлини виявляються вже на пізніх стадіях, коли часто нічим допомогти пацієнтові неможливо. Складність діагностики полягає в тому, що на ранніх етапах пухлина розвивається практично безсимптомно, і виявити її можна тільки в ході профілактичного огляду або при проведенні лабораторних аналізів.

Які аналізи на ракові клітини?

При проведенні дослідження на рак проводиться загальне об'єктивне обстеження за допомогою різних інструментальних методів, а також застосовуються лабораторні аналізи. Спочатку пацієнтові призначають стандартні клінічні аналізи. З них можна отримати загальне уявлення про процеси, які протікають в організмі. На злоякісні новоутворення може побічно вказувати підвищена кількість лейкоцитів, а також збільшення ШОЕ. Однак цієї інформації недостатньо, оскільки при будь-якому захворюванні, інфекційному або запальному процесі ці показники також підвищуються. На рак може також вказувати різке зниження гемоглобіну, особливо якщо порівнювати показники в динаміці. При виявленні подібних ознак призначається спеціальне дослідження, спрямоване на виявлення ракових клітин.

Проводиться розширений аналіз крові, в ході якого визначають специфічні маркери онкології. Ці маркери утворюються відразу ж, ще на етапі зародження пухлини. Тому вони дають можливість виявити трансформовані клітини і ракові пухлини на початкових стадіях їх формування.

Принцип методу діагностики полягає в тому, що за допомогою спеціальних тест-систем виявляють в крові онкомаркери, які продукуються раковими пухлинами. Чим важче стадія захворювання, тим більше їх концентрація в крові. Організм здорової людини онкомаркери не продукує. Таким чином, їх наявність є прямим підтвердженням ракової пухлини. За результатами можна судити про розмір пухлини, її різновиди та локалізації.

Показання аналізу на ракові клітини

Дослідження на ракові клітини проводиться при підозрі на рак, а також з профілактичною метою для ранньої діагностики ракових пухлин. Людям, старшим за 50 років, а також тим, хто потрапляє в групу ризику розвитку ракових пухлин, слід також періодично здавати аналіз. Аналіз проводиться при виявленні пухлини, характер якої неясний. Він дає можливість визначити, чи є пухлина доброякісної, або злоякісної. Також аналіз проводиться для відстеження результатів в динаміці у хворих на рак, для перевірки ефективності проведеного лікування.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Підготовка

Аналіз на онкомаркери особливої підготовки не вимагає. Єдине, що необхідно - взяти у лікаря напрямок. Потім протягом 2-3 днів до проведення аналізу дотримуватися легкої дієти (не вживати алкоголь, гострі, жирні, копчені страви, спеції). Здавати аналіз потрібно натщесерце. Останній прийом їжі повинен бути за 8 годин до дослідження. Пити вранці не можна, палити також. Кілька днів не перевантажувати організм, виключити фізична праця.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14],

Техніка аналізу на ракові клітини

Існує безліч технік. Все залежить від виду дослідження. Якщо проводиться аналіз крові на визначення онкомаркерів, він проводиться імуноферментними методами. В основі цього методу лежить реакція аглютинації, в ході якої маркер онкологічної пухлини виступає як чужорідний агент для організму (антиген). Імунна система відразу ж реагує на нього, виробляючи антитіло. Дія антитіл направлено на руйнування чужорідного організму і подальше його виведення. Антитіло знаходить антиген, який є маркером ракової пухлини, атакує його і стимулює руйнування. В ході цієї боротьби антиген і антитіло зливаються між собою, відбувається реакція аглютинації. Саме ці комплекси і виявляються в ході аналізу при введенні в кров антитіл.

Для цього у пацієнта забирають кров в потрібній кількості. Для запобігання згортання додають кілька крапель гепарину. Потім кров доставляють в лабораторії. Там виробляють поділ крові на фракції. Окремо виділяють сироватку крові, оскільки онкомаркери виявляються саме в сироватці. Для цього застосовують центрифугування. За допомогою спеціального апарату - центрифуги, кров в пробірці обертають при великій кількості оборотів. В результаті все формені елементи крові осідають на дно, в пробірці міститься тільки сироватка. З нею і проводять подальші маніпуляції.

Беруть спеціальний набір для аналізу (ІФА), на дно комірки вносять певну кількість сироватки крові. Додають спеціальне антитіло до ракової пухлини. Чекають протягом декількох годин. Якщо відбувається реакція комплексоутворення, в ході якої зливаються антитіла і антигени, значить, в крові присутній антиген, який і виступає онкомаркерів, що вказує на наявність ракової пухлини. Утворення комплексів антиген-антитіло можна побачити неозброєним оком, оскільки в пробірці з'являється помутніння і осад у вигляді пластівців. За ступенем каламутності можна судити про кількість онкомеркеров. Але для точності результатів, виробляють спеціальні вимірювання. Використовують міжнародний стандарт каламутності, або спектрофотометр, які по куту заломлення світла, що проходить через розчин, визначають його концентрацію і видають готовий результат.

Існує й інший метод - іммуномагнітное розмежування фракцій крові. Для цього застосовують спеціальний прилад, який дає можливість виявити онкологічні клітини шляхом визначення онкомаркерів, які приєднуються до зміненої клітці і стають видимими в магнітному полі. Точність цього методу досить висока - навіть з мільйона здорових клітин можна виявити одну ракову.

Також за допомогою подібних аналізів можна встановлювати точну кількість ракових клітин, швидкість їх поширення і спрогнозувати динаміку зростання. Також перевага цих аналізів полягає в тому, що вони дають можливість контролювати хід лікування, визначати ефективність терапії, а також з високою точністю підбирати препарати і їх оптимальне дозування. Точність дозування при лікуванні відіграє провідну роль, оскільки дозволяє ефективно боротися з ускладненнями, знижувати кількість ракових клітин, а також попереджати розвиток метастаз. Крім того, правильно подібна дозування знижує токсичний ефект від препаратів для організму.

Також існує метод дослідження біоптату, при якому на дослідження береться шматочок тканини. Потім проводиться цитологічне і гістологічне дослідження. Аналіз на цитологію на увазі приготування мікропрепарату з отриманого зразка тканини для подальшого вивчення його властивостей під мікроскопом. Вивчаються основні морфологічні, анатомічні властивості. Мікропрепарат з зразка здорової тканини різко відрізняється від такого ракової пухлини. Є певні відмінності в структурі, зовнішньому вигляді і відбуваються внутрішньоклітинних процесах. На ракову пухлину можуть вказувати і спеціальні включення.

Під час гістологічного дослідження проводять посів тканини на спеціальні живильні середовища, призначені для вирощування культури тканин. Протягом 7 днів посів культивують в спеціальних умовах, після чого відстежують характер росту пухлини, швидкість і напрямок. Це має важливу діагностичну значимість.

Аналіз крові на ракові пухлини

Найшвидший спосіб визначення онкологічного захворювання - провести аналіз крові. Проводиться таке дослідження протягом 1-2 днів, а при необхідності отримати термінові результати можна за 3-4 години. Це експрес метод, який все ж вимагає додаткових уточнюючих досліджень. Однак для отримання попереднього діагнозу і точної ідентифікації пухлини цього цілком достатньо. Аналіз дає можливість визначити навіть точну локалізацію пухлини і стадію онкологічного процесу.

Матеріалом дослідження слугує кров пацієнта. Аналіз проводиться вранці, натщесерце. В основному використовується для підтвердження або спростування діагнозу, дає можливість диференціювати доброякісну пухлину від злоякісної. Також застосовується для відстеження показників в динаміці з метою визначення ефективності лікування, контролю стану пухлини і попередження рецидивів.

Принцип методу полягає у визначенні основних антигенів, які продукуються раковими клітинами в ході розвитку пухлини. При їх виявленні можна точно сказати, що у людини рак. Однак якщо такі онкомаркери не були виявлені, негативний результат не видають. В такому випадку призначають додаткові дослідження.

Локалізацію пухлини можна визначити по виду онкомаркера. Виявлення в крові пацієнта антигену СА19-9, можна говорити про рак підшлункової залози. Маркер РЕА вказує на локалізацію пухлини в кишечнику, печінці, нирках, легенях і інших внутрішніх органів. Якщо виявлено СА-125, він вказує на онкологічний процес в яєчниках або придатках. Маркери ПСА і СА-15-3 вказують на рак простати і молочної залози відповідно. СА72-3 вказує на рак шлунка і рак легенів, Б-2-МГ вказує на лейкоз, лейкемію, миелому. При раку печінки і метастазах з'являється АПФ. Аналіз крові не є єдиним чинником, що підтверджує методом. Його потрібно застосовувати в комплексі з багатьма іншими факторами.

[15], [16], [17]

Аналіз на ракові клітини шийки матки

Ракові клітини шийки матки можна визначити за допомогою аналізу крові, який спрямований на виявлення онкомаркера. Як правило, в таких випадках виявляється РЕА, або раково-ембріональний антиген. Також для дослідження беруть мазок з піхви, шийки матки. Спочатку проводять попереднє цитологічне дослідження. В ході аналізу на цитологію можна виявити трансформовані клітини і специфічні включення, що вказують на онкологічні процеси.

Після цього проводиться біопсія при необхідності, в ході якої береться шматочок тканини для дослідження. Виробляється її посів на поживні середовища, інкубування, після чого вивчаються основні морфологічні та біохімічні властивості. На підставі отриманих даних робиться висновок про характер пухлини, ступеня її розвитку, концентрації ракових клітин.

[18], [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25], [26], [27], [28], [29]

Аналіз на раковий ембріональний антиген

Являє собою антиген, який використовують для діагностики і лікування раку шлунка, кишечника, прямої кишки, жіночих репродуктивних органів і молочних залоз. У дорослої людини в незначних кількостях продукується бронхами і легенями, виявляється в складі багатьох біологічних рідин і секретів. Показником є його кількість, яке різко зростає при онкології. Потрібно враховувати, що його кількість може бути підвищено і у людей, які страждають на аутоімунні захворювання, туберкульоз, доброякісними пухлинами і навіть у курців. Тому виявлення високої концентрації цих маркерів (20 нг / мл і вище) є тільки непрямим підтвердженням раку і потрібно обов'язково провести ряд додаткових досліджень. Також цей показник потрібно відстежувати в динаміці для того щоб мати можливість зробити повноцінні висновки. Матеріалом дослідження слугує венозна кров. Антиген виявляють в сироватці крові.

[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36]

Аналіз на мутацію ракових клітин

Під рецептором епідермального фактора росту на увазі трансмембранний рецептор, який взаємодіє з позаклітинними лигандами епідермальних чинників зростання. Бере участь в утворенні ракових пухлин багатьох органів, зокрема є достовірною ознакою раку легенів. Справа в тому, що в нормі основні гени спрямовані на забезпечення контролю над зростанням і розмноженням клітин організму. Клітини ростуть, розмножуються до певної межі, після чого ген подає сигнал про припинення подальшого розмноження, і клітини перестають ділитися.

Також ген контролює процес апоптозу - своєчасне відмирання старих, віджилих клітин. При мутаціях в генах вони перестають контролювати розмноження (проліферацію) і відмирання (апоптоз), подають сигнал про безперервне зростання, в результаті чого клітини необмежено ростуть і постійно, безконтрольно діляться. Це і призводить до утворення ракової пухлини, яка олічается здатністю до необмеженого росту. У самому примітивному вигляді, рак можна уявити, як безконтрольне розподіл і безсмертність клітини. Також процес розглядають як нездатність клітини до своєчасного відмирання.

Хіміотерапія і різні протипухлинні препарати спрямовані саме на руйнування і інактивацію цього гена. Якщо пригнічувати його активність вдається, то розвиток раку можна зупинити. Але за довгі роки лікування такими цілеспрямованими преперата, у гена, як і у будь-якого організму відбулася адаптація, і він став стійким до ряду засобів.

Після цього лікарські засоби були вдосконалені, змінилася їх формула, вони знову стали активні щодо даного гена. Але вдосконалюється і сам ген: він також неодноразово мутував, виробляючи кожен раз стійкість до препаратів. За тривалі роки накопичилося безліч різновидів мутацій цього гена, понад 25. Це тягне за собою неефективність специфічної терапії. Для того щоб не втрачати час на марне лікування, яке не буде ефективно, проводять аналіз на визначення мутації даного гена.

Наприклад, виявлення мутацій в гені KRAS вказує на те, що лікування раку легенів і товстого кишечника інгібіторами тирозинкінази буде неефективно. Якщо виявляються мутації в гені ALK і ROS1, це говорить про те, що потрібно призначати крізотініб, який швидко і ефективно пригнічує цей ген і запобігає подальший розвиток пухлини. Ген BRAF призводить до утворення меланомних пухлин.

Сьогодні існують препарати, які можуть блокувати активність цього гена і міняти його установку на необмежене зростання. Це призводить до того, що пухлина уповільнює зростання або припиняє рости. У комплексі з протипухлинними препаратами можна досягти значних результатів в лікуванні, аж до зменшення розмірів пухлини.

[37], [38], [39], [40], [41], [42],

Аналіз калу на ракові клітини

Зазвичай суть аналізу полягає в виявленні в калі прихованої крові. Ця проблема може виникнути на наявність онкологічного процесу в ободової або прямої кишки. Людям старше 45-50 років, які найбільш схильні до ризику розвитку ракових пухлин, необхідно здавати цей аналіз щорічно. Це може вказувати і на інші патології, але тоді необхідно провести додаткові дослідження для диференційної діагностики. Це ранній спосіб діагностики, який дає можливість виявити пухлину на етапі її зародження і вжити заходів для лікування. Часто за допомогою цього методу можна виявити навіть передраковий стан.

Біопсія на ракові клітини

Це дослідження, яке дає максимально точні і достовірні результати. Складається з двох етапів. На першому етапі роблять забір біологічного матеріалу для подальшого дослідження. Матеріалом служить шматочок тканини, взятий безпосередньо з того органу, в якому локалізована пухлина. По суті, за допомогою спеціальної техніки та інструментів, лікар відрізає шматочок пухлини і передає її для подальшого дослідження в лабораторію. Забір зазвичай проводиться із застосуванням місцевої анестезії.

На другому етапі біологічний матеріал піддається подальшому цитологічному і гістологічному дослідження. При цитологічному дослідженні готується микропрепарат, проводиться його вивчення під мікроскопом. За загальній картині, зовнішнім виглядом, характером включень, можна попередньо зробити введення про те, чи є пухлина доброякісної або злоякісної. Цей етап не перевищує 30 хвилин.

Після цього тканину вимочують і виробляють її посів в спеціальну живильне середовище, яка містить всі умови для зростання клітини. Поміщається культура в оптимальні умови, в інкубатор, витримують протягом місяця. Дослідження досить тривалий і визначається швидкістю росту клітин. Якщо це ракова пухлина, вона почне активно зростати. Доброякісна, неракові пухлина зростання не дає. Для прискорення зростання можна додати чинники зростання, які додатково стимулюють ріст пухлини. У такому випадку результати можуть бути отримані протягом 7-10 днів.

Виросла пухлина піддають подальшим біохімічним, мікроскопічним дослідженням і в кінцевому підсумку видають результат у вигляді остаточного діагнозу, в якому визначено вид пухлини, її стадія, поширеність і напрямок пухлинного росту. Це зазвичай остаточний варіант, які визначає результат зі 100% точністю.

[43], [44], [45], [46],

Норма

Якщо проводиться аналіз на визначення онкомаркерів, розшифрувати аналіз досить просто. При наявності онкологічного захворювання онкомаркери виявляються в організмі. В здоровому організмі онкомаркерів немає, оскільки вони продукуються тільки раковими клітинами. Виняток становить раковий ембріональний антиген, який в нормі присутній в організмі в мінімальних кількостях. Незначне підвищення концентрації може вказувати на різні соматичні патології, і тільки різке зростання, понад 20 нг / мл свідчить про наявність ракової пухлини. Крім того, по тому, який саме антиген виявлений, можна судити про локалізацію пухлини. Кожен орган продукує свій тип маркерів.

Розшифрувати результати біопсії ще простіше. Якщо спостерігається ріст клітин на живильному середовищі - пухлина злоякісна, якщо зростання немає - доброякісна.

Норма аналізу на ракові клітини

Однозначних показників для всіх видів раку немає. Кожен конкретний онкомаркер має свої показники норми. Крім того, вони істотно варіюють в залежності від віку і фізіологічних особливостей людини.

У загальному вигляді можна представити наступні показники:

• 0-1нг / мл - норма;
• 1-20 - доброякісна пухлина, передраковий стан, соматичні патології;
• 20-30 - ракова пухлина;
• Понад 30 - метастази.

Потрібно пам'ятати про те, що будь-яка пухлина навіть доброякісна може перерости в злоякісну. Відсутність онкомаркерів не завжди вказує на відсутність раку. Це привід для додаткового дослідження.

[47], [48], [49], [50], [51], [52], [53]

Пристрій для аналізу

Для проведення аналізів потрібне комплексне технологічне оснащення лабораторії. Для виявлення онкомаркерів потрібні спеціальні набори для імуноферментного аналізу, лабораторний посуд, дозатори, микропипетки, центрифуга, інкубатор, культиватор, спектрофотометр, або мас-спектрометр для вимірювання оптичної щільності, іммуномагнітний розмежувач.

Для проведення цитологічного, мікроскопічного, гістологічного дослідження потрібно мікроскоп з високою роздільною здатністю. Для гістології потрібна парова лазня, автоклав, сухожарової шафа, термостат, інкубатор, ексикатор, витяжна шафа.

Скільки робиться аналіз на ракові клітини?

Виявлення онокомаркеров, це експрес-метод, які дозволяє отримати попередні результати і підтвердити або спростувати діагноз. Він робиться досить швидко - 1-2 дня, при необхідності можна прискорити до 3-4 годин.

Найбільш достовірний і точний аналіз на ракові клітини - це біопсія, що дозволяє встановити остаточний діагноз. Такий аналіз робиться від 14 до 28 днів (залежить від швидкості росту клітинної культури). При необхідності можна прискорити до 7-10 днів шляхом створення спеціальних умов інкубування, додавання чинників зростання.