Серологічні маркери вірусу гепатиту B

HBsAg є зовнішнім компонентом вірусу гепатиту В, з'являється в крові пацієнтів з гострим гепатитом у продромальному періоді захворювання, зберігається приблизно 1-4 місяці та зникає під час одужання. Визначення HBsAg у крові є ознакою персистенції вірусу гепатиту В. Це спостерігається у пацієнтів із хронічними захворюваннями печінки. Можливі випадки «здорового носійства» HBsAg.

HBeAg – визначається в крові пацієнтів з позитивним HbsAg, виявляється на ранніх стадіях гострого вірусного гепатиту В невдовзі після появи HBsAg та зникає до моменту розвитку клінічної картини.

Коли запальний процес у печінці стає хронічним, HBeAg залишається разом з HBsAg у крові протягом тривалого періоду часу.

Наявність HBeAg відображає фазу реплікації вірусу гепатиту В та корелює з високою активністю запального процесу в печінці та контагіозністю пацієнта.

HBcAg – не виявляється в крові, знаходиться в ядрах гепатоцитів. В останні роки за допомогою імуноелектронної мікроскопії HBcAg також виявляють у цитоплазмі гепатоцитів пацієнтів.

Після інфікування вірусом гепатиту В у крові під час імунної відповіді з'являються антитіла до антигенів вірусу.

Першими з'являються антитіла до HbcAg - HBcAb (НbсАgАbо-dy), вже через 2-4 тижні після появи HBsAg. Більшість антитіл у цей час представлені класом IgM (HBcAblgM), які залишаються в сироватці крові пацієнтів протягом 6-9 місяців. Наявність HBcAblgM свідчить про гострий або хронічний гепатит з триваючою реплікацією вірусу гепатиту В. Дещо пізніше в крові з'являються HBcAb класу IgG, які можуть визначатися протягом багатьох років. Виявлення HBcAblgG може свідчити як про перенесений та повністю вилікуваний гострий вірусний гепатит В, так і про персистенцію вірусу гепатиту В.

Антитіла до HBeAg – HBeAb – з’являються приблизно через 2 тижні після початку гострого вірусного гепатиту B і, у міру зниження концентрації HBeAg, залишаються в крові від 1 до 5 років і більше. Поява HBeAb свідчить про одужання пацієнта або перехід гострого вірусного гепатиту в хронічний, при цьому реплікація вірусу гепатиту B припиняється або значно зменшується, відбувається інтеграція геному вірусу гепатиту B у геном гепатоцитів, що супроводжується зниженням активності запального процесу.

Антитіла до HBsAg – HBsAb – виявляються через 3-5 місяців після початку гострого гепатиту В. Вони можуть виявлятися в крові пацієнта протягом 5-10 років і більше. Поява цих антитіл свідчить про імунне вирішення інфекції, але не виключається наявність вірусу гепатиту В у гепатоцитах.

Деякі лікарі вважають, що лише ці антитіла мають захисні властивості та забезпечують імунітет до вірусу гепатиту В.

Сам вірус гепатиту В не має прямої цитопатичної дії (тобто сам вірус не руйнує гепатоцити); ураження печінки пояснюється вираженою імунною відповіддю організму на впровадження вірусу в гепатоцит.

У життєвому циклі вірусу гепатиту В розрізняють дві фази: фазу реплікації та фазу інтеграції.

Під час фази реплікації вірус відтворюється (розмножується). Гепатотропізм вірусу гепатиту В, його здатність проникати в гепатоцит, визначається білками зовнішньої мембрани пре-S-області. На мембранах гепатоцитів є зони полімеризованого альбуміну, що відповідають пре-S1-рецепторам.

Завдяки взаємодії пре-S-білків з їх рецепторами на поверхні гепатоцита, вірус прикріплюється до гепатоцита. У фазі реплікації вірусна ДНК проникає в ядро гепатоцита і на ньому, як на матриці, за допомогою ДНК-полімерази синтезується вірусний нуклеокапсид, що містить вірусну ДНК, антигени HBcAg, HBeAg, HBxAg. Антигени HBcAg та HBeAg є основною мішенню імунної системи. Потім нуклеокапсид мігрує з ядра в цитоплазму, де реплікуються білки зовнішньої мембрани (HBsAg) і таким чином збирається повний віріон. У цьому випадку надлишок HBsAg, не використаний для складання вірусу, потрапляє в кров через міжклітинний простір. Повне складання (реплікація) вірусу завершується презентацією його розчинного нуклеокапсидного антигену - HBeAg на мембрані гепатоцита, де його "розпізнають" імуноцити. Секреція HBeAg у кров відіграє величезну роль у захисті вірусу від впливу імунної системи. Встановлено, що циркулюючий HBeAg пригнічує обидві ланки імунітету. Клітинний імунітет пригнічується за рахунок зниження синтезу γ-інтерферону (він відіграє ключову роль у процесі розпізнавання антигенів вірусу гепатиту В Т-лімфоцитами), гуморальний імунітет – за рахунок пригнічення утворення антитіл В-лімфоцитами. Таким чином, HBeAg здатний викликати стан імунотолерантності, і це уповільнює його виведення з інфікованих гепатоцитів.

Здатність вірусу гепатиту В до мутації зараз встановлена. Мутації різної частоти можуть виникати практично у всіх генах вірусу гепатиту В, але найчастіше в області гена, що кодує синтез HBeAg. В результаті мутації вірус втрачає здатність синтезувати HBeAg, і це дозволяє вірусу уникнути нагляду імунної системи та елімінації. Таким чином, можна вважати, що мутацію вірусу можна розглядати як спосіб захисту від імунної системи та виживання (збереження) вірусу в організмі людини. Боніно (1994) визначає мутований вірус гепатиту В як «HBV мінус HBeAg». Його часто виявляють при найважчих захворюваннях печінки, спричинених вірусом гепатиту В, зокрема, при HbeAg-негативному варіанті хронічного гепатиту, який має такі ознаки:

• відсутність HBeAg у крові за наявності маркерів реплікації HBV;
• виявлення ДНК HBV у сироватці крові та HBcAg у гепатоцитах;
• наявність як цитоплазматичних, так і ядерних нуклеокапсидних антигенів HBV в інфікованих гепатоцитах;
• більш важкий клінічний перебіг захворювання;
• менш виражена відповідь на лікування інтерфероном порівняно з HBeAg-позитивним хронічним гепатитом B.

Отже, вірус типу HBV мінус HBeAg є більш патогенним, ніж дикий тип HBV, можливо, через вищу цитопатогенність або більшу ефективність цитотоксичних Т-лімфоцитів.

Наразі більш обґрунтованою є точка зору, що «HBV мінус HBeAg» зазвичай виявляється за відсутності толерантності до вірусу, тоді як популяції немутованого («дикого») вірусу переважають за наявності толерантності до нього. Нерозпізнаваність мутантного HBV зумовлює неадекватність імунної відповіді, що змінює перебіг та результат вірусного гепатиту B.

Маркерами фази реплікації вірусу гепатиту В є:

• виявлення в крові HBeAg, HBcAblgM (співвідношення HBcAbG/HBcAbM < 1,2), вірусної ДНК у концентрації > 200 нг/л (визначається за допомогою полімеразної ланцюгової реакції), ДНК-полімерази та пре-S антигенів (що характеризують функціональну активність рецепторів альбумін-чутливості);
• виявлення ДНК HBeAg та HBV у гепатоцитах.

У 7-12% пацієнтів із хронічним вірусним гепатитом В можливий спонтанний перехід фази реплікації в нереплікативну фазу (у цьому випадку з крові зникає HBeAg і з'являються HBeAb). Саме фаза реплікації визначає тяжкість ураження печінки та контагіозність пацієнта.

Встановлено, що реплікація вірусу гепатиту В відбувається не лише в печінці, а й у гемопоетичних клітинах-попередниках (у кістковому мозку); ендотелії; моноцитах, макрофагах лімфатичних вузлів та селезінки, ендотелії ниркових судин; залозистому епітелії та фібробластах строми шлунка та кишечника; у стромальних фібробластах яєчок; нейроцитах та стромальних фібробластах периферичних, нервових гангліїв; фібробластах дерми. У 1995-1996 роках реплікація вірусу гепатиту В була показана в тканинах серця, легень, мозку, статевих залоз, надниркових залоз, щитовидної та підшлункової залози.

Позапечінкова реплікація вірусу гепатиту В може бути причиною розвитку різних позапечінкових (системних) проявів захворювання – хронічної генералізованої інфекції.

Під час фази інтеграції фрагмент вірусу гепатиту В, що несе ген HBsAg, інтегрується (вбудовується) в геном (ДНК) гепатоцита, з подальшим утворенням переважно HBsAg. У цьому випадку реплікація вірусу припиняється, але генетичний апарат гепатоцита продовжує синтезувати HBsAg у великих кількостях.

Вірусна ДНК може інтегруватися не лише в гепатоцити, але й у клітини підшлункової залози, слинних залоз, лейкоцити, сперматозоїди та клітини нирок.

Фаза інтеграції супроводжується встановленням клінічної та морфологічної ремісії. У цій фазі в більшості випадків формується стан імунологічної толерантності до вірусу, що призводить до пригнічення активності процесу та носійства HBsAg. Інтеграція робить вірус недоступним для імунного контролю.

Серологічні маркери фази інтеграції:

• наявність у крові лише HBsAg або в поєднанні з HBcAblgG;
• відсутність вірусної ДНК-полімерази та ДНК-вірусу в крові;
• сероконверсія HBeAg у HBeAb (тобто зникнення HBeAg з крові та поява HBeAb).

В останні роки встановлено, що при гепатиті В інтеграція геному вірусу з геномом гепатоцитів є не обов'язковою, а необов'язковою. У переважної більшості пацієнтів з гострим гепатитом В він не розвивається. У рідкісних випадках хронічна HBV-інфекція може протікати без інтеграції з геномом інфікованих гепатоцитів. У таких пацієнтів реєструється триваюча активна реплікація HBV.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]