Аналіз крові на вірус Епштейна-Барра на антитіла і ПЛР: як правильно здавати, норма

Під герпесом ми звикли розуміти неестетичні хворобливі бульбашкові висипання на обличчі в області губ, які згодом утворюють коричневі скоринки. На жаль, це лише одна з осіб вірусу герпесу, який у людини може зустрічатися в 8 іпостасях. Те, що ми зазвичай називаємо герпесом, це вірус 1 типу, або вірус простого герпесу. 2-й тип вірусу викликає генітальний герпес, 3-й - «вітрянку» і оперізувальний лишай, 4-й - інфекційний мононуклеоз і ще кілька інших досить небезпечних патологій і т.д. Цей список можна продовжити і далі, але ми зупинимося на герпесвірусами 4 типу, який інакше називають вірусом Епштейна-Барра. Спробуємо розібратися, що собою являє вірус герпесу 4 типи, чим він небезпечний, коли і навіщо проводять аналіз на вірус Епштейна-Барра та про що говорять результати лабораторних досліджень.

Що собою являє вірус герпесу 4 типи?

Герпесвірус 4 типу, як один з різновидів герпесвірусної інфекції, був описаний 53 роки тому англійським вірусологом Майклом Епштейном. У роботі над проектом професора допомагала його аспірантка Івонна Барр. Саме цим людям вірус зобов'язаний своєю назвою. Однак вже через 15 років після знайомства з вірусом, його наукова назва була змінена на людський герспесвірус 4, а рік тому вірус стали називати людським гамма-вірусом 4 типи.

Але що ж являє собою вірус Епштейна-Барра? Як і будь-який інший вірус, віріон (вірусна часіца) герпесвірусу 4 типу складається з генетичного матеріалу (в даному випадку двухцепочная ДНК) і навколишнього його білкової оболонки (капсид). Дололнітельно вірус оточений мембраною, яка допомагає йому легко припадати всередину клітин господаря.

Будь-вірус - це некліткова форма, яка є інфекційним фактором і не може розвиватися і розмножуватися поза клітинами живого організму. Улюбленим місцем проживання герпесвірусу 4 типу вважаються епітеліальні клітини носоглотки. Не гидують вони і лейкоцитами, віддаючи перевагу одній їх різновиди, званої В-лімфоцитами. Саме В-клітини беруть активну участь у забезпеченні імунного захисту організму. При контакті з антигеном, яким в нашому випадку виступає вірус герпесу 4 типи (точніше його антигени), В-лімфоцити виробляють антитіла (білки-імуноглобуліни). Саме їх і можна виявити в крові хворого, проводячи аналіз на вірус Епштейна-Барра (ВЕБ).

У вірусу герпесу четвертого типу виділяють 4 антигену, які з'являються строго в певній послідовності:

• ЕА - ранній антиген, який з'являється на початковому етапі хвороби, коли вірусні частинки знаходяться в стадії синтезу (первинна гостра інфекція або реактивація зачаївся вірусу при зниженні імунітету),
• VCA - капсидний антиген, який міститься в білковій оболонці і також відноситься до ранніх, адже клінічно хвороба в цей період ще може навіть не проявлятися,
• MA - мембранний антиген, з'являється коли вирион вже сформований,
• EBNA - ядерний (поліпептидний або нуклеарний) антиген відноситься до числа пізніх антигенів, антитіла до якого можуть виявитися навіть через кілька місяців після хвороби і залишатися в крові протягом усього життя.

Герпесвірус 4 типу дуже підступний. Оскільки поза живим організмом вірус неактивний, то заразитися ним можна лише від людини, що є джерелом інфекції. І зовсім не обов'язково, щоб у нього виявлялися всі симптоми хвороби, інфекція може мати стерту форму, маскуючись під звичайну втому. Наприклад, синдром хронічної втоми у більшості випадків пов'язують саме з вірусом Епштейна-Барра.

Окремі віріони можуть виявлятися в крові, слині, спермі, вагінальному секреті, тканинах різних органів. Частинки вірусу разом зі слиною і кров'ю можуть потрапити не оточуючі нас предмети, де вони будуть перебувати в неактивному стані, поки якимось чином не потраплять в організм людини. У переважній більшості випадків зараження відбувається повітряно-крапельним або контактним (через поцілунки) шляхом. Але можлива також внутрішньоутробна передача вірусу від матері до плоду, зараження під час процедури переливання крові (якщо донорська кров містила віріони вірусу), при статевому контакті.

Після потрапляння в організм і впровадження в клітинні структури, може пройти від 5 до 50 днів, перш ніж хвороба нагадає про себе. Але ж може і не нагадати, протікаючи в прихованій формі, як це буває в більшості випадків.

Так, згідно з дослідженнями, близько 90% дорослого населення хоча б раз в житті перенесли герпетичну інфекцію, асоційовану з ВЕБ. Більшість людей навіть не підозрювали про це, оскільки їх організм зміг впоратися з вірусною атакою. Але так відбувається не завжди.

Як проявляє себе вірус Епштейна-Барра?

Найчастіше лікарям доводиться стикатися у своїй практиці з такими видами течії герпесвірусної інфекції 4 типи:

• Хронічна форма (настає після гострої фази захворювання, має деякі загальні симптоми нездоров'я),
• Латентна або прихована форма (симптомів немає, але вірус залишається активним і виділяється в навколишнє середовище),
• Повільна форма (зустрічається рідше, симптоми виникають по одному протягом тривалого періоду, закінчується смертю пацієнта).

Вперше людина заражається вірусом Епштейна-Барра переважно в дитячому та підлітковому віці. Пік захворюваності припадає на вік від 14 до 18 років.

Первинна вірусна інфекція має 3 різні форми:

• бессимптомная (немає клінічних проявів),
• респіраторна (симптоми респіраторної інфекції: підвищена температура, виділення з носа, загальна слабкість і т.д.),
• інфекційний мононуклеоз з тріадою основних симптомів: висока температура, ознаки ангіни з жовтуватими корочками на мигдалинах, збільшення таких органів, як печінка і селезінка; при цьому спостерігається підвищення рівня лейкоцитів і збільшення лімфовузлів.

Існує кілька варіантів виходу з гострої фази захворювання:

• повне одужання,
• симптоми хвороби зникають, але вірус залишається в організмі і розвивається, правда вже не призводить до помітних змін в клітинах (вірусоносійство),
• симптомів хвороби немає, вірус не покидає організм, але і проявляє особливої активності (латентна форма),
• повторна активація (реактивація) вірусу з латентної форми,
• хронічний перебіг інфекції (з рецидивами хвороби, хронічна активна форма, генералізована з ураженнями органів і систем організму).

Результатом тривалого перебування вірусу в організмі можуть стати:

• Хронічна форма інфекційного мононуклеозу.
• Гематофагоцітарний синдром : стабільна лихоманка, зниження компонентів крові (підвищена згортання), збільшення печінки і селезінки, кровоточивість слизових, жовтяниця (через порушення роботи печінки), збільшення лімфовузлів, неврологічні симптоми.
• Стерта форма з розвитком вторинного імунодефіциту : гіпертермія протягом тривалого часу, загальна слабкість, збільшення і хворобливість лімфовузлів, м'язові і суглобові болі, часті інфекційні захворювання.
• Розвиток аутоімунних патологій у вигляді червоного вовчака, ревматоїдного артриту та ін.
• Прояви синдрому хронічної втоми з погіршенням загального самопочуття і працездатності.
• Генералізована форма хронічної інфекції з ураженням ЦНС, міокарда серця, нирок, печінки, легенів.
• Розвиток онкологічних захворювань (лімфолейкози і лімфоми), при яких спостерігається патологічне збільшення кількості клітин лімфатичної системи. Вірус герпесу 4 типи не знищує клітини-носії, а змушує їх активно розмножуватися, в результаті чого виявляються новоутворення з лімфоїдної тканини.

Як бачимо, вірус Епштейна-Барра зовсім не так нешкідливий, як здається на перший погляд, а значить, ставитися до нього безтурботно не варто. Тим більше, що для герпесвірусу 4 типу характерні часті епізоди вирусоносительства і латентної форми, не кажучи вже про різні форми хронічної інфекції, коли людина залишається джерелом інфекції, сам того не підозрюючи.

Визначити наявність інфекційного агента в організмі в цьому випадку можна лише за допомогою спеціального аналізу на вірус Епштейна-Барра, біоматеріалом для якого зазвичай служить кров.

Показання аналізу на вірус Епштейна-Барра

Оскільки герпевирусной інфекцію 4 типи виявити часом не так просто, підозра на неї падає далеко не завжди. Але є певні ознаки, за якими лікар може запідозрити наявність вірусу в організмі:

• сильно ослаблена імунна система (в групі ризику знаходяться пацієнти з ВІЛ-інфекцією та СНІДом, пацієнти після трансплантації органів або хіміотерапії),
• збільшення регіональних лімфовузлів в області підборіддя і потиличної частини голови і їх болючість, особливо якщо таке спостерігається після переливання крові або пересадки органів від донора.
• гостра респіраторна вірусна інфекція (ГРВІ), що протікає на тлі дуже високих температур (38-40 градусів),
• поява ознак інфекційного мононуклеозу, який найчастіше і виникає під впливом вірусу Епштейна-Барра.

Навіть якщо вищеперелічених ознак у людини немає, підозра у фахівця можуть викликати деякі результати звичайних аналізів (загальний аналіз та біохімія крові), а також дослідження імунного статусу.

Загальний аналіз крові при вірусі Епштейна-Барра може показати:

• збільшення числа лімфоцитів,
• низький гемоглобін, що вказує на зниження рівня еритроцитів,
• підвищене згортання крові через великої кількості тромбоцитів,
• поява віроцити (атипових лімфоцитів, схожих за будовою з моноцитами).

Біохімічний аналіз крові, який дає інформацію про стан внутрішніх органів, покаже зміни в роботі печінки і селезінки.

Імунний аналіз при ВЕБ може показати зміну кількості специфічних лімфоцитів, невідповідність в кількості імуноглобулінів різних класів (дісіммуноглобулінемія), дефіцит імуноглобуліну G, що говорить про слабкість імунної системи і її нездатності стримувати натиск вірусу.

Такі результати неспецифічних аналізів можуть насторожити лікарів, але сказати точно, з чим вони мають справу поки що не можна. Все залишиться на стадії припущень і попереднього діагнозу. У більшості випадків лікарі підозрюють приховану форму інфекційного мононуклеозу, хоча таким же чином можуть проявляти себе і інші вірусні патології (грип, гепатит і т.д.).

У зв'язку з великою поширеністю гепатиту 4 типу і можливістю передачі його від матері дитині аналіз на вірус Епштейна-Барра виявиться корисним і при плануванні вагітності. Якщо мати раніше вже перенесла інфекцію, її організм виробив антитіла до неї. Повторне зараження зазвичай виключається через формування стійкого імунітету, а якщо і станеться, то вже не буде мати тих наслідків, які можливі при першій зустрічі з вірусом. Імунітет буде стримувати активність вірусу протягом усього життя, хоча сам вірус так і залишиться всередині організму, як і будь-який з герпесвирусов.

Якщо ж майбутня мама підхопила вірус герпесу під час вагітності, то це загрожує викиднями і передчасними пологами, або вірус негативно відіб'ється на внутрішньоутробний розвиток дитини.

Аналіз на ВЕБ може бути призначений онкологом при підозрі на лімфому Беркета або діагностиці пухлинних процесів у людей з ВІЛ. Терапевт може вдатися до такого аналізу в діагностиці герпетичних інфекцій (диференціальна діагностика для уточнення типу вірусу). Іноді аналіз проводять і для оцінки ефективності проведеного лікування.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

Підготовка

Залежно від виду дослідження біоматеріалів для нього можуть служити кров, слина, сеча, мокротиння, проба навколоплідних вод, зішкріб, який береться з цервікального каналу або уретри, спинномозкова рідина (ліквор). Найчастіше лікарі вдаються до дослідження крові, яке вважається найбільш інформативним.

Зрозуміло, що деякі моменти можуть негативно відбитися на якості і кількості біоматеріалу, тому напередодні варто дотримуватися певних правил:

• Будь-які аналізи (особливо аналіз крові) рекомендується здавати з ранку натщесерце. Останній прийом їжі повинен бути не пізніше, ніж за 12 годин до забору крові, так що на вечерю краще випити води.
• Найбільш прийнятним матеріалом для аналізу на вірус Епштейна Барра вважається венозна кров, а перед здачею крові з вени завжди рекомендується 15-хвилинний відпочинок, якщо людина тільки прийшла в лабораторію,
• Щоб забір крові пройшов без наслідків і результат аналізу був достовірним, протягом 12 годин до процедури не рекомендується виконувати активну фізичну роботу і займатися спортом, вживати спиртні напої, палити.
• На результатах аналізів може відбитися і прийом лікарських засобів. Від ліків потрібно відмовитися як мінімум за 2 дні до аналізу. Якщо цього зробити не можна, потрібно обов'язково повідомити лабораторну медсестру про прийнятих препаратах.
•  При вагітності перед дослідженням на ВЕБ проводять аналіз на токсоплазмоз, щоб виключити псевдопозитивну реакцію.
• Якщо аналіз крові на вірус Епштейна-Барра роблять дитині молодше 5 років, за півгодини до маніпуляцій потрібно давати малюкові пити багато кип'яченої води порівняно невеликими порціями.

Якщо для аналізу береться інший біоматеріал, потрібно у лікаря заздалегідь уточнити всі нюанси підготовки до аналізу в залежності від використовуваного матеріалу.

[10], [11], [12],

Техніка аналізу на вірус Епштейна-Барра

Важливу роль в діагностиці герпесу 4 типи та інфекційного мононуклеозу медики відводять специфічним аналізам, які допомагають виявити ДНК вірусу або унікальні антитіла в біоматеріалу пацієнта. До основних видів лабораторних досліджень, що застосовуються для виявлення вірусу Епштейна-Барра в організмі людини, відносяться імуноферментний аналіз (ІФА) і ПРЦ-діагностика. Розглянемо докладніше суть обох методів і особливості їх проведення.

Імуноферментний аналіз на ВЕБ

ІФА - це дослідження (аналіз) венозної крові пацієнтів на антитіла до вірусу Епштейна-Барра. В результаті діагностики в крові пацієнтів з ВЕБ виявляються імуноглобуліни виду IgG або IgM (всього їх 5відов) до одного з 3 антигенів вірусу (раннього, капсидному або ядерного).

Проводять аналіз в імунологічної лабораторії, де у пацієнта беруть близько 10 мл крові з вени. Далі біоматеріал залишають при кімнатній температурі на чверть години, протягом яких кров згортається. Згусток акуратно відокремлюють від рідкої частини. Рідина центрифугируют і отримують чисту сироватку (серум) крові. Саме її і піддають подальшому дослідженню.

Ідея методу виникла на підставі даних про те, що в нашому організмі виробляються специфічні антитіла до кожного з видів вірусів і бактерій, що проникають в організм ззовні. Організм розпізнає в них чужака і знищує за допомогою унікальних антитіл, які міцно зчіплюються з антигеном.

Суть аналізу ІФА грунтується саме на цій реакції. Антитіла з прикріпленими до них мітками з'єднуються з антигенами. На мітки наноситься речовина, яка при реакції зі спеціальним ферментом змінює забарвлення зразка. Чим більше таких «ланцюжків», тим інтенсивніше колір біоматеріалу.

Імуноферментний аналіз може проводитися трьома методами:

• Прямий ІФА. Досліджувану рідину поміщають в лунки і залишають приблизно на півгодини, щоб антигени могли прикріпитися до стінок лунки. До сорбованих антигенів додають рідина з позначеними антитілами. Після закінчення потрібного часу (від півгодини до 5 годин), коли антитіла виявили і зв'язалися з антигенами, рідину зливають, лунки акуратно промивають і додають в них фермент. Методом колоризації визначають концентрацію вірусу в одиниці крові.
• Непрямий ІФА. При цьому способі до сорбованих на поверхні лунок антигенів додають досліджувану сироватку крові і мічені антитіла. В результаті отримують 2 види зв'язок, частина з яких виходить поміченої. Результат залежить від концентрації антигенів в досліджуваному зразку. Чим більше немічених антитіл, тим менше з'єднань, помічених ферментом.

Далі до промитий складу додають спеціальний реагент, за яким і визначають ферментативну активність комплексів антиген-антитіло.

• «Сендвіч». Відрізняється від непрямого методу тим, що спочатку на поверхні сорбують НЕ антигени, а антитіла. До них додають розчин, що містить досліджувані антигени. Після промивання носія додають антитіла з ферментативними мітками. Надлишок антитіл знову видаляють і за допомогою перекису водню отримують забарвлену субстанцію, яку вивчають спектрометрическим методом.

Даний вид аналізу дозволяє не тільки виявити специфічні антитіла і визначити концентрацію антигенів, але і уточнити стадію захворювання. Справа в тому, що різні антигени вірусу Енпштейна-Барра з'являються на різних етапах герпетичної інфекції, а значить і антитіла до них виробляються в певному періоді хвороби.

Так, антитіла IgG до раннього антигену (IgG EA) з'являються в крові через 1-2 тижні після зараження, коли хвороба перебуває в гострій стадії або стадії реактивації вірусу. Зникають імуноглобуліни цього типу через 3-6 місяців. При хронічному перебігу вірусної інфекції таких антитіл особливо багато, а при атипової формі вони відсутні взагалі.

Антитіла IgG до капсидному антигену (IgG VCA) також з'являються рано, протягом перших 4-х тижнів хвороби, але найбільше їх визначається до другого місяця інфекції. У гострій фазі вони виявляються у більшості пацієнтів, але у дітей вони можуть і не з'являтися. При хронічному перебігу хвороби, особливо в періоди реактивації вірусу, кількість IgG VCA особливо велике. Ці антитіла у людини в крові залишаються назавжди, як і сам вірус, що говорить про сформованому імунітет до інфекційного збудника.

Антитіла IgM до капсидному антигену (IgM VCA) можуть з'явитися ще до появи перших ознак хвороби. Особливо велика їх концентрація (титри) в перші 6 тижнів хвороби. Цей вид антитіл характерний для гострої інфекції і реактивації хронічної. Зникають IgM VCA через 1-6 місяців.

Антитіла IgG до ядерного гену (IgG EBNA) можуть говорити про те, що людина раніше безпосередньо зіткнувся в герпетичної інфекцією. У гострій фазі захворювання вони виявляються вкрай рідко, зазвичай з'являючись в період одужання (на 3-10 місяць). У крові їх можна виявити ще через кілька років після перенесеної інфекції.

Виявлення окремих антигенів не дає повної картини захворювання, тому аналізи на різні антитіла повинні проводитися в сукупності. Наприклад, якщо присутні лише IgM VCA, а IgG EBNA не виявляються, мова йде про первинну інфекції.

На жаль, для виявлення первинної герпетичної інфекції або вродженої патології імуноферментного аналізу часто недостатньо. В останньому випадку антитіла можуть взагалі не виявлятися. Як підтверджуючий тесту при первинному захворюванні використовують молекулярне дослідження крові або іншого біологічного матеріалу на вірус Епштейна-Барр.

ПРЦ-аналіз на вірус Епштейна-Барра

Даний аналіз проводять на етапі гострої первинної інфекції, в іншому випадку його результат буде некоректним.

Суть методу ПРЦ (поліразмерной ланцюгової реакції) зводиться до того, що кожен інфекційний збудник має свій набір генів, укладений в молекулі ДНК. ДНК збудника міститься у взятому для дослідження біоматеріалу в невеликих кількостях (самі-то віруси мають мікроскопічні розміри), так що оцінити ситуацію дуже складно. Зате якщо провести специфічну реакцію кількість генетичного матеріалу помітно збільшиться, що дасть можливість назвати збудника хвороби на ім'я.

За допомогою одноразових інструментів беруть матеріал для молекулярного дослідження, який поміщають в спеціальний апарат для проведення аналізу. Прилад являє собою термостат зі спеціальною програмою - термоциклер або ампліфікатор. В апараті кілька десятків разів прокручується повний цикл ПРЦ (близько 2-3 хвилин), який має 3 етапи:

• Денатурація (при температурі 95 градусів відбувається роз'єднання ниток ДНК).
• Відпал (при температурі 75 градусів в досліджуваний матеріал вводяться спеціально заготовлені «затравки» для ВЕБ, які прикріплюються до ДНК вірусу).
• Подовження або розмноження генетичного матеріалу (до затравки при температурі 72 градуси приєднується спеціальний фермент, який відтворює нову ланцюжок ДНК, збільшуючи тим самим кількість генетичного матеріалу удвічі).

Якщо повний цикл поліразмерной реакції прогнати 50 разів, кількість матеріалу збільшиться в 100 разів. А значить, виявити збудника буде набагато простіше.

Аналіз на вірус Епштейна-Барра у дитини

Як ми вже знаємо, вірус Епштейна-Барра може стати причиною розвитку багатьох захворювань. Потрапивши одного разу в організм людини, він залишається його постійним жителем, і тільки злагоджена робота імунної системи не дозволяє йому активно паразитувати всередині клітин.

Майже 95% дорослого населення планети живе з ВЕБ всередині, і більшість з них познайомилися з вірусом ще з раннього дитинства. Кому-то він дістався у спадок від матері, а інші отримали вірус від батьків і родичів, які поспішають до дитини з поцілунками, або повітряно-крапельним шляхом в дитячому садку або школі (інфекційні захворювання там зазвичай набувають «вселенські» масштаби).

Маленьким діткам взагалі властиво все тягнуть до рота, а більше число віріонів виявляється саме в слині. І якщо в саду одну і ту ж іграшку облизують кілька дітей, поки вихователі зайняті своїми справами, то не дивно, що вірус так активно поширюється в великих колективах малюків.

ВЕБ можна спокійно назвати хворобою дітей та молоді, адже в підлітковому віці вже половина дітей мають вірус в організмі (а до 30 років і близько 90% дорослих). Хворіють діти в різні вікові періоди по-своєму. До року, поки дитина активно не спілкується з людьми, ймовірність захворіти у нього невелика. Малюк старше року, навіть якщо він не пішов в дитячий сад, стає більш товариським, грає з однолітками на вулиці, робить з мамою активні походи по магазинах і т.д., і ймовірність захопити вірус стає набагато вище.

Але це не привід замикати дитину в 4-х стінах. У віці 1-3 років хвороба в переважній більшості випадків протікає без яких би то не було симптомів, хіба що з незначним підняттям температури і легким нежитем, нагадуючи застуду. Виходить, що чим раніше дитина знайомиться з вірусом, тим легше протікає таке знайомство.

Недобре, якщо дитина перехворіє без появи в крові антитіл IgG VCA, що може говорити про те, що імунітет до вірусу не сформувався, і можлива реактивація вірусу, як тільки імунна система дасть слабину. Причиною є, швидше за все, недосконалість імунної системи маленьких дітей, яка знаходиться в стадії формування кілька років.

Шкільне життя дає ще більше передумов до захворювання, особливо в підлітковому періоді, коли молодь активно практикується в поцілунках. Але у дітей старше 3 років хвороба рідше має безсимптомний лікування. У більшості випадків лікарі стикаються з інфекційний мононуклеоз з властивими йому симптомами.

Незважаючи на те, що патологія може мати тривалий перебіг (близько 2 місяців), вона не настільки небезпечна і не вимагає застосування серйозних препаратів. Лікарі призначають протизапальні та противірусні засоби, якщо приєднується бактеріальна інфекція, звертаються за допомогою до антибіотиків. До речі, пеніциліни в цьому випадку застосовувати не рекомендуються в зв'язку з тим, що вони можуть провокувати появу шкірної висипки.

Не треба думати, що якщо дитина або підліток захворів на інфекційний мононуклеоз, значить, у нього в організмі оселився вірус Епштейна-Барра. У хвороби є й інші не настільки часті збудники, наприклад, цитомегаловірус (вірус герпесу 5 типу). Щоб зрозуміти, з чим лікарі мають справу, призначають аналіз на вірус Епштейна-Барра, а при необхідності і інші лабораторні дослідження.

Так само вірно і те, що інфекційний мононуклеоз не є єдиним проявом ВЕБ в дитячому віці. Є й інші захворювання, асоційовані з цим збудником, але в нашому регіоні вони зустрічаються рідко.

Так лімфома Беркітта (а саме їй ВЕБ зобов'язаний своїм виявленням) зустрічається переважно у дітей африканських країн, дуже рідко в Америці, ще рідше в Європі (і то лише на тлі СНІДу). Щелепна пухлина з ураженням лімфовузлів, нирок та інших органів виявляється у малюків 3-8 років.

Назофарингеального рак, значна частина інших лімфом, волохата лейкоплакія рота - все це прояви ВЕБ на тлі сильно зниженого імунітету, що буває при ВІЛ-інфекції та її більш пізній стадії СНІДу.

Вродженийімунодефіцит і приєднання вірусу Епштейна-Барра - небезпечна суміш, яка може привести до розвитку у дитини пролиферативного синдрому. У цьому випадку збільшення кількості В-лімфоцитів призводить до появи грануляту в багатьох органах, що не дає їм нормально функціонувати. Це хвороба з високим рівнем летальності, але на тлі нормального імунітету вона не розвивається.

Можна сказати, що в дитячому віці вірус Епштейна-Барра небезпечний в основному при імунодефіциті через розвиток різних ускладнень. У більшості випадків все обмежується на інфекційний мононуклеоз. І хоча особливого лікування він не потребує, лікарі вважають за краще все ж встановити природу збудника хвороби, для чого дитині і призначають загальний аналіз крові, імуноферментний аналіз і ПРЦ.

Оскільки в дитячому віці має місце в основному первинна інфекція, то цілком можна обмежитися лише ОАК і ПРЦ, який досить інформативний при вперше виявленому захворюванні.

[13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22],

Норма

Обробка результатів ПРЦ-аналізу проводиться шляхом електрофорезу або із застосуванням мічених «запалів». В останньому випадку достатньо лише додати реагент (хромоген) і по фарбуванню визначити, чи є віріони в пробі. Про позитивному результаті при електрофорезі говорять тоді, коли в досліджуваному зразку виявляються нитки ДНК, що відрізняються своєю довжиною.

В інкубаційному періоді хвороби і безсимптомному вирусоносительстве ПРЦ дасть негативний результат, як і в разі абсолютного отсутсвия вірусу в організмі. На початку розвитку первинної інфекції та на ранніх її стадіях ПРЦ в реальному часі може давати як позитивні, так і негативні результати, яких не прояснює ситуацію.

Зате в розпалі хвороби (гостра фаза), при хронічному її перебігу або повторної активації вірусу (загостренні) і в разі атипових форм аналіз буде позитивним. Якщо ж людина давно перехворів і вірус в його організмі знаходиться в неактивному стані, ПРЦ аналіз дасть негативний результат, тобто проведення даного аналізу в цей період також недоцільно, як і в занадто ранній термін хвороби.

Потрібно сказати, що точні результати даного виду лабораторних досліджень можливі лише при первинній інфекції і відсутності віріонів інших вірусів.

Тепер, що стосується імуноферментного аналізу на вірус Епштейна-Барра. У нього ті ж вимоги. Наявність в організмі герпесвірусу 5 або 6 типів, токсоплазмозу, а також ВІЛ-інфекції може спотворити результат не менше, ніж недбале ставлення до проведення аналізу або погана якість використовуваних реагентів. У такому випадку може знадобитися проведення додаткових досліджень з урахуванням можливих збудників хвороби.

Нормальними показниками аналізу, які говорять про відсутність вірусу в організмі, вважається негативний результат все 4 тестів: на IgG ЕА, IgM VCA, IgG VCA і IgG EBNA. Так, кожен тест проводиться окремо, адже антигени з'являються в різні періоди хвороби. Іноді можуть бути призначені лише окремі тести, але в більшості випадків доводиться робити все 4 аналізу, але в різні періоди хвороби.

Наприклад, в інкубаційному періоді захворювання, як і при відсутності інфекції, в крові не виявляється жодного з 4 видів антитіл. Такий результат можна вважати достатнім, адже він не дозволяє диференціювати вперше хвору людину від здорового.

На початку розвитку первинного захворювання в крові з'являються лише антитіла IgM VCA. У ранні терміни хвороби до них приєднуються IgG VCA.

Гостра стадія первинної інфекції протікає з утворенням трьох типів антитіл: IgG VCA, IgM VCA і IgG ЕА, при цьому найбільше виявляється антитіл IgG до капсидному антигену. Той же склад антитіл зберігається і протягом півроку після гострої фази хвороби, але кількість IgM VCA поступово зменшується до нуля.

Через півроку після хвороби в крові з'являються антитіла IgG EBNA, в той же час імуноглобулінів IgG ЕА стає все менше, а IgM VCA відсутні взагалі.

При хронічному перебігу хвороби або реактивації вірусу можуть бути різні показники. Найчастіше в крові виявляються всі 4 типи антитіл. Але цілком може статися і так, що імуноглобуліни IgM VCA і IgG EBNA не виявлять.

Ускладнення вірусної інфекції пухлинними процесами протікає з відсутністю антитіл IgM VCA, а імуноглобуліни IgG EBNA виявляються не у всіх випадках.

Але імуноферментний аналіз визначає не тільки наявність певних антитіл, але і їх концентрацію, що дозволяє з більшою точністю судити про стадії патології, а також про її можливі наслідки. Тут вже говорити про конкретні цифри не доводиться. Адже кожна лабораторія проводить аналіз одним з можливих способів, використовуючи різні реактиви, тому в цифровому оформленні результати аналізу різних лабораторій можуть відрізнятися.

Пацієнту в обов'язковому порядку видається бланк, де будуть вказані порогові (референтні) значення величин. Якщо результат нижче порогового значення, це вважається нормальним (негативні) показником. Якщо визначається число вище референтного значення, все вказує на позитивний результат, а значить, вірус живе в організмі. Величина визначається значення говорить про стадії хвороби і заселеності організму вирионами ВЕБ, тобто про тяжкість патології.

Якщо ІФА дає негативний результат, це говорить лише про те, що в минулому у людини не було контакту з ВЕБ. А ось чи присутній вірус в організмі в даний час сказати з упевненістю не можна. Негативний результат адже може давати інкубація збудника в організмі і безсимптомне вірусоносійство. Іноді, щоб переконатися в незаселеними організму вірусом, потрібно провести 2-ю серію аналізів через деякий час.

Якщо результат імуноферментного аналізу на вірус Епштейна-Барра лише злегка перевищує референтні значення, результат вважається сумнівним. Причиною найчастіше стає рання стадія хвороби або наявність в організмі віріонів іншого вірусу. У цьому випадку через 2 тижні рекомендується зробити повторний тест на ВЕБ і можливо на інших збудників.

[23], [24], [25], [26], [27], [28], [29], [30],

Що стосується питання, скільки робиться аналіз на вірус Епштейна-Барра та коли можна чекати результати, то тут особливих труднощів не передбачається. У серйозній добре оснащеної лабораторії відповідь доведеться чекати не більше 2 днів після здачі біоматеріалу. У ситуаціях, що вимагають термінового аналізу, відповідь може бути отриманий навіть через пару годин.

Проводити аналіз на вірус Епштейна-Барра потрібно в перевіреної лабораторії, де є і якісні реагенти, і кваліфіковані фахівці. Все-таки дослідження коштує грошей (і не малих, аналіз на один вид антитіл обходиться десь в 150-170 грн.), І не хотілося б при цьому отримати помилковий результат, а згодом можливо знову звертатися, але вже в іншу лабораторію, для проведення повторного аналізу. 

[31], [32], [33], [34], [35]