Мікробіологічне дослідження мокротиння

Мікробіологічне дослідження є найважливішою ланкою в діагностичному пошуку та верифікації збудника пневмонії. Воно передбачає не лише виділення збудника, а й вивчення його властивостей, зокрема чутливості до різних лікарських засобів з бактерицидною та бактеріостатичною дією.

Для цього використовується метод посіву мокротиння на різні поживні середовища. У зразку мокротиння, доставленому в лабораторію, відбирають гнійні грудочки та ретельно промивають їх у чашці Петрі ізотопним розчином хлориду натрію, що певною мірою дозволяє звільнити їх від мікрофлори верхніх дихальних шляхів. Посів гнійних грудочок мокротиння проводять на різні поживні середовища, склад яких описано в спеціальних посібниках з мікробіології. Середовища з посівами інкубують при температурі 37,5°C протягом 24 годин. З вирослих колоній виділяють чисті культури, ідентифікують їх відомими мікробіологічними методами та визначають їх чутливість до антибіотиків.

Для визначення кількісного вмісту мікроорганізмів мокротиння гомогенізують, змішують з поживним бульйоном і з суміші готують послідовні десятикратні розведення, які висівають на чашки Петрі з кров'яним агаром. Після 24 годин інкубації при 37,5°C результати враховують, підраховуючи колонії одного типу за зовнішнім виглядом та враховуючи ступінь розведення матеріалу. З колоній готують мазки та досліджують їх під мікроскопом.

Інтерпретація результатів

Інтерпретація результатів мікробіологічного дослідження мокротиння є досить складною, що пояснюється низкою факторів. Вище вже згадувалося про постійне обсіменіння бронхіального вмісту мікрофлорою верхніх дихальних шляхів та ротової порожнини та часту присутність у нормальному трахеобронхіальному вмісті здорових людей більшості найтиповіших збудників захворювань дихальних шляхів (пневмококи, стрептококи, стафілококи тощо). У зв'язку з цим виділення в мокротинні під час мікробіологічних досліджень асоціації різних мікроорганізмів, більшість з яких у цьому конкретному випадку є умовно-патогенними, вкрай ускладнює встановлення збудника захворювання. Тому для інтерпретації результатів мікробіологічного дослідження мокротиння необхідно враховувати кількісне переважання певного виду бактерій (більше 106-107 мк ^/мл ), появу певних мікроорганізмів у фазі загострення та їх зникнення в період ремісії. Дуже важливо враховувати клінічну картину захворювання.

Основні та можливі збудники різних клінічних форм пневмонії

Клінічна форма пневмонії	Основні патогени	Можливі патогени
Крупоз	Пневмококи	Стрептококи, клебсієла
Після грипу	Стафілококи, пневмококи, клебсієли	Haemophilus influenzae, стрептококи
Абсцесування	Стафілококи, бактероїди, змішана флора	Клебсієла, синьогнійна палич
Прагнення	Бактероїди, анаеробні стрептококи	Стафілококи, пневмококи
Післяопераційний	Стафілококи	Пневмококи, клебсієла
Міжсторінкове оголошення	Мікоплазми	Збудники орнітозу, пситакозу
Вторинна пневмонія у госпіталізованих пацієнтів без попередньої антибактеріальної терапії	Стафілококи, пневмококи, клебсієли, бактероїди	Кишкова паличка, серратія тощо.
Вторинна пневмонія, що розвинулася на тлі антибактеріальної терапії	Факультативно-патогенні мікроорганізми	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus тощо.
У пацієнтів із хронічним бронхітом	Пневмококи, Haemophilus influenzae	Стафілококи, стрептококи
У пацієнтів з алкоголізмом	Пневмококи, гемофільна паличка, клебсієла	Кишкова паличка, найпростіші
При синдромі набутого імунодефіциту	Пневмоцист, грибки	Цитомегаловіруси
У пацієнтів, догляд за якими надається сторонніми особами	Пневмококи, стафілококи, гемофільні сосочки	Клебсієла, кишкова паличка

При кількісній оцінці результатів дослідження мікробного забруднення у пацієнтів з пневмонією необхідно пам'ятати про надзвичайно високу чутливість цього показника до призначення антибіотиків. Навіть короткочасне лікування антибактеріальними препаратами може призвести до різкого зниження мікробного забруднення, що не дозволяє адекватно оцінити результати дослідження мокротиння. Тому доцільно зібрати мокротиння перед призначенням антибіотикотерапії.

Слід також зазначити, що для культивування внутрішньоклітинних збудників пневмонії (мікоплазма, легіонела, хламідії, рикетсії) використовуються спеціальні селективні поживні середовища. Рутинне мікробіологічне дослідження з використанням звичайних поживних середовищ (агар-агар) ніколи не дає позитивних результатів. Тому вибір конкретних методів мікробіологічного дослідження повинен здійснюватися за участю лікаря, який зобов'язаний повідомити лікаря-лаборанта про свої підозри щодо можливої ролі внутрішньоклітинних збудників у виникненні пневмонії у цього пацієнта.

Слід додати, що в реальній клінічній практиці навіть технічно досконале мікробіологічне дослідження мокротиння дозволяє ідентифікувати збудника не більше ніж у 40-60% випадків. Тому для верифікації збудника можна використовувати інші сучасні методи дослідження. Інформативність бактеріологічного дослідження можна значно підвищити, використовуючи як досліджуваний біологічний матеріал не мокротиння, а трахеобронхіальний аспірат – рідину, отриману під час бронхоальвеолярного лаважу (БАЛ), бронхоскопії тощо.

Крім того, для ідентифікації збудників пневмонії можна використовувати метод імунофлуоресценції різних біологічних матеріалів (матеріал бронхоскопії, кров, плевральний вміст тощо), методи ПЛР-діагностики, а також дослідження рівня специфічних антитіл у сироватці крові. На жаль, ці методи діагностики ще не знайшли широкого клінічного застосування та наразі використовуються лише у великих спеціалізованих центрах та лабораторіях.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]