Мікробіологічне дослідження мокротиння

Мікробіологічне дослідження є найважливішою ланкою діагностичного пошуку і верифікації збудника пневмонії. Воно передбачає не тільки виділення збудника, але і вивчення його властивостей, в тому числі чутливість до різних медикаментозних препаратів, які мають бактерицидну і бактеріостатичну дію.

З цією метою використовують метод посіву мокротиння на різні поживні середовища. У зразку мокротиння, доставленої в лабораторію, відбирають гнійні грудочки і ретельно промивають їх у чашці Петрі з ізотопічним розчином натрію хлориду, що до певної міри дозволяє звільнити їх від мікрофлори верхніх дихальних шляхів. Посів гнійних грудочок мокротиння проводять па різні поживні середовища, склад яких описується в спеціальних інструкціях по мікробіології. Середовища з посівами інкубують при 37,5 ° С протягом 24 год. З вирослих колоній виділяють чисті культури, ідентифікують їх відомими мікробіологічними методами і визначають чутливість до антибіотиків.

Для кількісного визначення вмісту мікроорганізмів мокроту гомогенизируют, змішують з поживним бульйоном і з суміші готують послідовні десятикратні розведення, які засівають на чашки Петрі з кров'яним агаром. Через 24 год інкубації при 37,5 ° С враховують результати, підраховуючи однотипні за зовнішнім виглядом колонії і з огляду на ступінь розведення матеріалу. З колоній готують мазки і проводять мікроскопію їх.

Інтерпретація результатів

Трактування результатів мікробіологічного дослідження мокротиння досить складна, що пояснюється рядом факторів. Вище вже згадувалося про постійне обсеменении бронхіального вмісту мікрофлорою верхніх дихальних шляхів і ротової порожнини і частому присутності в нормальному трахеобронхиальном вмісті здорових людей більшості найбільш типових збудників респіраторних захворювань (пневмококів, стрептококів, стафілококів та ін.). У зв'язку з цим виділення в мокроті в ході мікробіологічних досліджень асоціації різних мікроорганізмів, велика частина з яких в даному конкретному випадку є умовно-патогенними, надзвичайно ускладнює встановлення збудника захворювання. Тому для інтерпретації результатів мікробіологічного дослідження мокротиння слід враховувати кількісне переважання того чи іншого виду бактерій (понад 10 ⁶ -10 ⁷ м.к. / мл), поява певних мікроорганізмів в фазі загострення і зникнення їх в період ремісії. При цьому дуже важливо враховувати клінічну картину захворювання.

Основні і можливі збудники різних клінічних форм пневмоній

Клінічна форма пневмонії	Основні збудники	Можливі збудники
Крупозна	Пневмококки	Стрептококи, клебсіопл
Постгріппозня	Стафілококи, пневмококи, клебсієли	Гемофільна паличка, стрептококи
Абсцедуюча	Стафілококи, бактероїди, змішана флора	Клебсієли, синьогнійна паличка
Аспіраційна	Бактероїди, анаеробні стрептококи	Стафілококи, пневмококи
Післяопераційна	Стафілококи	Пневмококки, клебсієли
Intersticial	Мікоплазми	Збудники орнітозу, пситтакоза
Вторинна пневмонія у госпітальних хворих без попередньої антибактеріальної терапії	Стафілококи, пневмококи, клебсієли, бактероїди	Кишкова паличка, серрація і ін.
Вторинна пневмонія, що розвинулася на тлі антибактеріальної терапії	Факультативно-патогенні мікроорганізми	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus і др.
У хворих на хронічний бронхіт	Пневмококки, гемофільна паличка	Стафілококи, стрептококи
У хворих на алкоголізм	Пневмококки, гемофільна паличка, клебсієли	Кишкова паличка, найпростіші
При синдромі хронічної імунологічної недостатності	Пневмоцисти, гриби	Цитомегаловіруси
У хворих, догляд за якими здійснюють сторонні	Пневмококки, стафілококи, гемофільна татко	Клебсієли, кишкова паличка

Оцінюючи кількісно результати дослідження мікробного обсіменіння у хворих на пневмонію, слід пам'ятати про надзвичайно високої чутливості цього показника до призначення антибіотиків. Навіть короткочасне лікування антибактеріальними препаратами може призводити до різкого зниження мікробного обсіменіння, що не дозволяє адекватно оцінити результати дослідження мокротиння. Тому доцільно здійснювати забір мокроти до призначення лікування антибіотиками.

Слід також зазначити, що для культивування внутрішньоклітинних збудників пневмоній (мікоплазми, легіонелли, хламідії, рикетсії) використовують спеціальні селективні поживні середовища. Рутинне мікробіологічне дослідження з використанням звичайних поживних середовищ (агар-агар) ніколи не дає позитивних результатів. Тому вибір конкретних методів мікробіологічного дослідження повинен проходити за участю лікуючого лікаря, який зобов'язаний інформувати лікаря-лаборанта про наявні у нього підозри щодо можливої ролі внутрішньоклітинних збудників у виникненні пневмонії у даного пацієнта.

Слід додати, що п реальній клінічній практиці навіть технічно досконале мікробіологічне дослідження мокротиння дозволяє виявити збудника захворювання не частіше, ніж в 40-60% випадків захворювання. Тому для верифікації збудника можуть бути використані інші сучасні методи дослідження. Інформативність бактеріологічного дослідження може бути істотно підвищена при використанні в якості досліджуваного біологічного матеріалу не мокроти, а трахеобронхіального аспирата, рідини, отриманої при бронхоальвеолярному лаваже (жвалами), бронхоскопії і т.п.

Крім того, для виявлення збудників пневмонії може бути використаний метод імунофлюоресценції різних біологічних матеріалів (матеріал бронхоскопії, кров, плевральное вміст і.т.п.), методи ПЛР-діагностики, дослідження рівня специфічних антитіл в сироватці крові. На жаль, до цих нір ці способи діагностики не знайшли широкого клінічного застосування і поки використовуються лише в великих спеціалізованих центрах і лабораторіях.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]